标准名称_13096.docx

ICS?点击此处添加ICS号点击此处添加中国标准文献分类号???????中华人民共和国卫生行业标准WS/T XXXXX—XXXX?????肠道蠕虫检测改良加藤厚涂片法?????Detection of intestinalhelminths: theKato-Katz method点击此处添加与国际标准一致性程度的标识（本稿完成日期：2016.5.31）XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会?????发布目??次前言II1　范围12　规范性引用文件13　术语和定义14　仪器设备15　试剂材料16　检测步骤2附录A（资料性附录）　人体粪便中蠕虫卵鉴别4附录B（资料性附录）　改良加藤厚涂片中虫卵的计数方法8附录C（资料性附录）　其他注意事项10参考文献11前??言本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由国家卫生标准委员会寄生虫病标准专业委员会提出。本标准起草单位：中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所、江西省寄生虫病防治研究所、云南省大理州血吸虫病防治研究所。本标准主要起草人：陈颖丹、诸廷俊、周长海、许静、郑彬、李石柱、肖宁、周晓农、曾小军、刘宏坤 。人体蠕虫检测改良加藤厚涂片法?????范围本标准规定改良加藤厚涂片检测技术的操作流程。本标准适用于各级疾病预防控制机构和医疗机构对人体粪便内蠕虫卵的检测。术语和定义下列术语和定义适用于本标准。改良加藤厚涂片法modified Katos thick smear通过过滤，定量板取样，用甘油亲水玻璃纸对粪样进行透明的一种粪便中蠕虫卵的定性与定量检测方法。每克粪便虫卵数 eggs pergram，EPG指1克粪便中某种寄生虫卵的数目，是改良加藤厚涂片法中用来表示感染强度的指标。人体蠕虫 human helminth寄生于人体内借助肌肉伸缩而做蠕形运动的多细胞无脊椎动物。仪器设备光学显微镜（100×－400×）和测微尺试剂材料试剂透明液的成分及配制：由纯甘油100ml、3%孔雀绿（或亚甲基蓝）1ml和蒸馏水100ml配制而成。材料塑料定量板规格为30mm×40mm×1mm，中央孔为圆台形，其短径3mm，长径4mm，高1mm，容积为38.75mm3 刮棒60mm ×6mm ×2mm，一端平头，另一端为斜切面，斜切面斜边长8.23mm。尼龙绢80目，即每英寸（25.4mm）长度内的筛孔数目为80，裁剪成8cm×8cm大小。亲水性透明玻璃纸厚40μm，裁剪成25mm×40mm大小，使用前在透明液中浸泡24h以上。载玻片 76.2mm ×25.4mm×1mm。检测步骤样本采集检测样本为新鲜的粪便。采集受检者粪便约30克，存放于广口带盖且防渗漏的密闭容器中，将受检者基本信息（姓名、编号、送检日期）标记于容器外部。采集后的样本应在24h内送检，如未能及时检测，应在4℃条件下保存。改良加藤厚片制作取一张洁净的载玻片，在一端标注样本编号。将塑料定量板小孔朝上放置在载玻片中部。将尼龙绢平放在粪便上摊开，用刮棒轻压尼龙绢，使尼龙绢与粪便紧密贴合，再用刮棒在尼龙绢上方刮取粪便。将通过尼龙绢刮出的粪样填入定量板的中央孔中，直至填满刮平。垂直向上移去定量板，使粪样留在载玻片上。取一张已浸泡过的玻璃纸，抖掉多余的浸泡液后，覆盖在粪便上。取另一块洁净载玻片十字交叉垂直均匀轻压粪样，使亲水玻璃纸下的粪便均匀展开，不溢出载玻片，形成厚薄一致的圆形粪膜，粪膜直径约2 cm 。用拇指固定亲水玻璃纸，将用来压粪样的载玻片轻轻平移取下，制好的改良加藤厚涂片放置在室温下使其透明。镜检将已透明的改良加藤厚涂片置于光学显微镜下镜检，在10×物镜下按一定规律，如由上到下，由左至右检查全片，如需进一步鉴别在40×物镜下观察。结果判定根据改良加藤厚涂片中虫卵的大小、形状、颜色、卵壳、内容物、卵盖、小棘等特征综合判定虫种。（附录A）计数改良加藤厚涂片中虫卵数量，计算EPG，并判定感染强度。（附录B ）（资料性附录）人体粪便中蠕虫卵鉴别虫卵种类通过改良加藤厚涂片法能够检测到的寄生虫卵有：似蚓蛔线虫卵、毛首鞭形线虫卵、蠕形住肠线虫卵、钩虫卵（十二指肠钩口线虫卵和美洲板口线虫卵）、曼氏迭宫绦虫卵、阔节裂头绦虫卵、带绦虫卵（猪带绦虫卵、牛带绦虫卵、亚洲带绦虫卵）、微小膜壳绦虫卵、缩小膜壳绦虫卵、司氏伯特绦虫卵、华支睾吸虫卵、布氏姜片吸虫卵、卫氏并殖吸虫卵、日本血吸虫卵、片形吸虫卵（肝片形吸虫卵、巨片形吸虫卵）、异型科吸虫卵、棘口科吸虫卵等，上述虫卵可在显微镜下通过其形状、大小、颜色、内容物、卵盖结构等加以鉴别（见表A.1）。人体粪便中蠕虫卵鉴别要点虫卵大小形状颜色卵盖卵壳内容物其他特征模式图华支睾吸虫卵（27~35）μm×（12~20）μm 形似芝麻，一端较窄淡黄褐色有卵盖周围的卵壳