心血管药理学的研究方法PPT.pptVIP

● 心血管系统的结构 1、心脏 2、血管 (1) 动脉 主动脉 外周动脉 (2) 静脉;● 高脂血症的研究; 血脂异常是血中总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白—胆固醇（LDL-C）、甘油三酯（TG）超过正常范围及（或）高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）低下。 高脂血症是指TC或（和）LDL-C或（和）TG增高。血脂异常在动脉粥样硬化（AS）的发生发展及其引起的心血管事件（CVE）中起非常重要的作用。; 高TC血症，特别是LDL-C增高，是发生CHD的最重要的危险因素。 流行病学资料显示，芬兰TC最高，CHD发病率也最高，日本TC最低，CHD发病率也最低。;;降脂中药筛选及药理学研究;体外筛选细胞模型 (研究阶段);体内筛选动物模型 (用于降脂药物筛选及机制研究);家 兔;◎ 灌胃给药操作不便，灌胃不当易造成死亡。 ◎ 高脂血症模型及动脉粥样硬化斑块形成时间较长，耗费饲料，动物成本较高。 ◎ 血清中VLDL占总胆固醇的比例过高，且兔为草食动物，其脂代谢与人差异较大。 ● 因无较为理想的高脂血症动物模型，目前有关调脂新药和抗动脉粥样硬化药物的研究中，家兔仍然是一种常用的实验动物。 ;大鼠是目前国内研究人类脂质代谢使用最多的实验动物。选用SD大鼠或Wister大鼠造模。 ◎ 易于饲养管理，抵抗力较强 ◎ 给药容易 ◎ 采样方便，血量丰富，便于一次较多指标的检测 ◎ 在国外高脂血症研究中，大鼠的使用逐渐减少。 a. 大鼠血清中高密度脂蛋白(HDL)是血浆胆固醇的主要载体。 b. 对抗动脉粥样硬化形成的能力;◎ 用高脂饲料喂养大鼠，一般7-10天可形成高脂血症模型。 ◎ 影响因素： a. 饲料中掺人了胆固醇、猪油等油腻的高脂物 品，使饲料性质发生改变，有异昧，动物易出现“厌 食”；而且不易于掌握精确的饲料用量。 b. 进口胆酸纳价格昂贵。 c. 高脂乳剂黏稠，不易抽取，灌胃造模时，用量不易准确控制。 d. 所造模型大多为外源性胆固醇摄入过量所致。;小鼠在调血脂药临床前研究中应用越来越多。 ◎ 价格便宜，造模成本低，采样较方便。高脂饲料喂养可成功建立高脂血症模型。基因缺损和基因敲除小鼠已成功地用于药理学研究中。 ◎ 具有清楚的遗传背景，繁殖力强，模型稳定。 ◎ 血脂水平与人类接近，主动脉和冠状动脉均有明显的斑块形成，可用于动脉粥样硬化的实验研究。 ◎ apoE基因缺损小鼠及LDL基因敲除小鼠血脂升高不受人为因素影响。;◎ 急性高脂蛋白血症的可用一种表面活化剂(Triton WR-1 339)给小鼠尾静脉注射，12～24 h即可诱导出高脂蛋白血症模型 ，可用作初筛新药。 ◎ 正常小鼠用高脂饲料喂养造模时间长。 ◎ 采血量少，指标的检测受限。;◎ 普通饲料喂养时，成年鼠血清胆固醇水平是正常鼠的5～8 倍。 ◎ 当给予高脂负荷饲料(20 %脂肪，0.3 %胆固醇后) ，血清中胆固醇浓度可达普通饲料喂养升高值的4～5 倍。 ◎ 血脂升高稳定。 ◎ 遗传背景为C57BL/6品系。 ◎ 繁殖能力较强。;◎ 行动灵敏，易发生逃逸。 ◎ 性情较其他品系小鼠急，抓持不当易被咬伤。 ◎ 成年雄鼠之间易发生撕咬。;◎ 较好地反映人类胆固醇代谢的调节。如肝脏合成胆固醇的比例，人内源性胆固醇约有90%是肝外组织合成的，雄性金黄地鼠肝外合成比例约为85%，而雌性大鼠只有35%是肝外合成、雌性小鼠只有55%在肝外合成。 ◎ 较低的高脂负荷即可建立理想的动物模型。饲料中胆固醇含为0.2%即可成功造模。大鼠饲???中胆固醇的含量多为1-2%，超过自身合成量的10倍， 且要在饲料中加入胆汁酸盐才有能达到理想的血脂水平。 ◎ 建立高脂血症模型所需时间短。喂饲高脂饲料后3-4周，血TC、TG 可达较为稳定的水平。;降脂中药的药理学研究(一);◎ 载脂蛋白含量的测定 apoAI apoB apoC ◎ LDLR活性测定 放射性配基法 酶联免疫吸附法 激光共聚焦显微镜测定法 ◎ LDLR基因表达;● 动脉粥样硬化的研究;与动脉粥样硬化形成有关的细胞和分子;Fatty-Streak Formation in Atherosclerosis;Unstable Fibrous Plaques in Atherosclerosis;ApoE Knockout Mice;抗动脉硬化中药的药理学研究(一);抗动脉硬化中药的药理学研究(二);● 血管再狭窄的研究;动物模型;塑料微导管损伤模型;金属丝颈动脉损伤模型;金属直弹簧丝股动脉损伤模型;C57BL/6 Mice (Recipient);P