微生物实验操作规范.docVIP

细菌实验操作部分 ㈠ 培养基的配置 操作步骤 1.称量：按培养基配方比例依次准确称量放入烧杯中（用称量勺，称量纸和电子天平）。 2.在烧杯中先加入少量所需蒸馏水，用玻璃棒搅匀，然后再石棉网上加热使其溶解。待药品完全溶解后，补充水分到所需总体积。如果配制固体培养基，将称好的琼脂放入已溶化的药品中，再加热溶化，在琼脂溶化过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底。 3.调pH：在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养基pH值，如果偏酸，用滴管向培养基中加入1mol/L NaOH,边加边搅拌，并随时用pH试纸测，反之用1mol/L HCL。 4.分装：（1）液体分装高度以试管高度的1/4左右为宜。 （2）固体分装分装试管，其装量不超过管高的1/5，灭菌后制成斜面，分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。 （3）半固体分装试管一般以试管高度的1/3为宜，灭菌后垂直待凝。 5.加塞：培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞或硅胶塞，以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染，并保证有良好的通气性能。 6.包扎：加赛后，将全部试管用皮筋捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸（报纸即可），以防止灭菌时冷凝水润湿。用记号笔注明日期名称。 7.灭菌：将上述培养基放入121摄氏度，20分钟高压蒸汽灭菌。 8.搁置斜面：将灭菌的试管培养基冷至50°C左右，将试管塞端搁在玻璃帮上，搁置的斜面长度以不超过试管总长的一