高效液相色谱法测定桂枝茯苓颗粒中丹皮酚的含量测定.docVIP

精品论文 参考文献 高效液相色谱法测定桂枝茯苓颗粒中丹皮酚的含量测定 安柏晶　牟书才　(黑龙江仁合堂药业有限责任公司　黑龙江牡丹江　157011） 【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）44-0194-02 【摘要】 目的 建立反相高效液相色谱法测定桂枝茯苓颗粒中丹皮酚含量测定。方法　采用超场提取法制备供试品溶液，以C18柱作为色谱柱，乙腈-水-冰醋酸（35：65：2）为流动相；检测波长：274nm。样品平均加样回收率为98.79%（n=6）,RSD值为1.20%,重复性试验RSD值丹皮酚为1.21%(n=6)。结论　方法简便，准确，重复性好，可作排毒清脂片的含量测定方法。 【关键词】　桂枝茯苓颗粒　高效液相色谱法　含量测定 1　仪器、试药与样品 1.1仪器：安捷伦1200高效液相色谱仪、紫外检测器。 1.2试药：丹皮酚（批号：0708-9704）由中国药品生物制品检定所提供；乙腈、冰醋酸均为（色谱纯），甲醇为（分析纯），水（纯净水）。 1.3样品：自制三批。 2　方法与结果 2.1样品的制备 取本品适量，研细，精密称取0.4g，精密加100ml甲醇，称定重量，超声提取30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，滤过，取续滤液，即得。 2.2阴性样品溶液的制备 按质量标准处方比例同法制备不含牡丹皮的阴性样品溶液。 2.3对照品溶液的制备 精密称取丹皮酚对照品适量，加甲醇制成每1ml含丹皮酚15mu;g的溶液，即得。 2.4检测波长的选择　取上述对照溶液，用紫外可见分光光度计在波长190-500nm处扫描，结果，丹皮酚在274nm处有吸收峰，故检测波长为274nm。 2.5色谱条件　色谱柱：C18柱(岛津VP-ODS C18 150times;4.6mm)，流动相：乙腈-水-冰醋酸（35：65：2）为流动相；流速：1.0ml/min，柱温：25℃；检测波长：274nm。 2.6线性关系考察　精密称取大黄素对照品10.06mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取1mu;l、2mu;l、4mu;l、8mu;l、16mu;l，分别置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得，分别进样10mu;l，测定，以峰面积积分A对大黄素进样量C(mu;g)进行回归分析，得回归方程：C=5.131times;10-8A+2.976times;10-3 r=1.000。表明大黄素进样量在0.014～0.224mu;g范围内线性关系良好。 2.7精密度试验　分别取大丹酚对照品溶液（15.0924 mu;g/ml），重复进样5次，记录峰面积，RSD分别为：0.19%，表明精密度较好。 2.8重复性试验　按供试品溶液的制备方法，对同一批样品分别制备6份供试品溶液，依法测定，计算丹皮酚的含量及相对标准偏差，RSD分别为：1.08%、1.44% 2.9稳定性实验　取同一批号样品溶液，分别在放置0、4、8、12h后，依法操作，测定峰面积A，RSD分别为1.76%，表明稳定性较好。 2.10加样回收率实验 取批品5袋，研细，取0.2g，精密称定，共计5份，分别精密加入1.164mg/ml的丹皮酚对照品溶液0.5ml,按“含量测定”项下试验，测定加标样品中丹皮酚含量，计算，得出6次平均回收率为98.79%，表明方法回收率较好。 2.11样品测定　按正文含量测定方法依法测定本品，以峰面积按外标一点法计算样品中丹皮酚的含量，结果每袋丹皮酚的含量平均为8.64（mg/袋），RSD为1.25%，含量较可靠稳定。 3　讨论与小结 根据2010年版中国药典一部牡丹皮药材项下的要求（分别采用紫外分光光度法和HPLC法），牡丹皮药材含丹皮酚???得少于1.2%。本品每袋含牡丹皮药材0.72g，理论最低丹皮酚含量为不得低于8.64mg/袋，乙醇提取丹皮酚浸出率为85%，浓缩中丹皮酚收得率控制在90%，颗粒干燥工艺丹皮酚的收得率控制在90%,因此成品中丹皮酚含量限应确定为：8.64mg/袋times;85%times;90%times;90%=5.95mg/袋，因此将丹皮酚含量限定为不得低于6mg/袋。占理论药材最低含量的69.4%。 参 考 文 献 [1]国家药典委员会编.中华人民共和国药典,2010.