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阿尔茨海默病患血管血清转换酶变化水平的研究课题负责人：王 宁 2014级临床3班 指导老师 ：刘姝余 解剖教研室流 程立项依据阶段目标研究内容预期成果实验方法前期准备流 程立项依据疾病介绍致病机制研究现状立项依据神经保护作用Aβ40AIAβ42致病机制ACE ACE2TAIAβ43立项依据ACEI应用方向1.心血管疾病 2.呼吸系统疾病AD治疗方向1.改善胆碱系统功能 2.干扰Aβ形成和沉积研究现状 在已有的实验中已经证实ACE与ACE2的同时作用，可使Aβ43转换为Aβ40.·田金洲,时晶，尹军祥等．阿尔茨海默病发病机制中的血管性病理因素.Chin J M ult Organ Dis Elderly,Feb 2007 Vol 6 No 1.·李延峥,王巍,杨德久等.阿尔兹海默病中Aβ寡聚物引起神经突触功能障碍的机制.中国煤炭工业医学杂志,1007-9564(2016)12-1811-04.·郑嵋戈等.β淀粉样蛋白的代谢机制.神经解剖学杂志,2011，27(3)：344-348·Amy C Arnold, Patricia E Gallagher，et al. Brain renin–angiotensin system in the nexus of hypertension and aging in Hypertension Research (2013) 36, 5–13 2013 The Japanese Society of Hypertension All rights reserved 0916-9636/13.·Kun Zou, Tomoji Maeda, Shuyu Liu , et al.Aβ42-to-Aβ40- and Angiotensin-converting Activities in Different Domains of Angiotensin-converting Enzyme in Press, September 22, 2009, DOI 10.1074/jbc.M109.011437. ·Shuyu Liu, Junjun Liu,et al.Conversion of Aβ43 to Aβ40 by the Successive Action ofAngiotensin-Converting Enzyme 2 and Angiotensin-Converting Enzyme in Journal of Neuroscience Research 92:1178–1186 (2014).参考文献流 程研究内容？主要问题：ACE、ACE2毒性Aβ沉积降低研究问题重点难点：Aβ在SHSY5Y细胞成功表达AD患者血清ACE水平对Aβ患者有无影响.流 程试验方法无菌细胞培养pAPPswe质粒转染实验流程SHSY5Y细胞高度表达Aβ试剂中APP ABβ42 ABβ43 ABβ40的测定Aβ的减少SHSY5Y神经细胞减少空白对照DMEM培养液ACE正常人血清ACE、ACEI混合正常人血清与ACEI混合APPAβ40Aβ42Aβ43实验表格空白对照DMEM培养液ACE病患血清ACE、ACEI混合病患血清与ACEI混合APPAβ40Aβ42Aβ43实验表格空白对照DMEM培养液ACE2病患血清ACE、ACEI混合病患血清与ACEI混合APPAβ40Aβ42Aβ43实验表格流 程阶段目标 2017年10月-2018年01月??周期性培养及观察细胞，进行免疫组化等实验测试。 2017年05月-2017年09月??学习相关实验方法和仪器，了解抗体及药品，动物饲养，血清采集与管理，设计相关实验步骤。 2018年02月-2018年05月??整理实验数据，进行分析统计，发表论文。流 程1.揭示ACE和ACE2的酶活性及含量的体内调节在AD的发病机制中起到重要作用。ACE、ACE2理论意义：Aβ42、Aβ43 Aβ40神经保护预期成果实践意义：应用ACE、ACE2毒性 Aβ沉积降低临床用药指导2.在校报发表综述或论文一篇预期成果3.为临床用药指导提供参考流 程1.本课题组成员有大三学生三名，大二学生两名，均为临床专业，已经学习过医学基础课相关科目，掌握一定实验技能。指导教师对淀粉样蛋白见转换及 AD发病机制有一定的研究经验，能够指导本课题的顺利进行。完成保证指导老师 刘姝余2.本校有相应的仪器设备，下设细胞培养室，分子生物学实验室，免疫组化验室和电镜室等，已具备本课题研究所需的全部实验条件。Task GroupNUMBER王 宁 课题实施指导成文孙文博 动物饲养徐 静 免疫组化王馨艺细胞培养于国