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(课件)-第五章发酵动力学研究对象:菌体生长、基质消耗、产物生
根据体系物料平衡原理有: (1)菌体增长: (2)限制性基质 这里: (基质的菌体得率) (基质的产物得率) 式中: F,F’:基质流量(L/h); X:细胞浓度(g菌体/L); V:发酵液体积(L); S0:流入基质浓度(g基质/L) S:流出基质浓度(g基质/L) YX/S:基质的菌体得率(g菌体/g基质) YP/S:基质的产物得率(g产物/g基质) QP:比产物生成速率(g产物/g菌体.h) X:菌体浓度(g菌体/L) m:碳源维持常数(g基质/g菌体.h) P:发酵液中产物浓度(g产物/L); k:产物分解常数(h-1); (3)产物生成 产物浓度变化=生成量-流出量-分解量 用于分批发酵,F,F’=0,考虑产物不分解,则分批发酵动力学为: 菌体浓度变化: 产物浓度变化: 基质浓度变化: 二、补料分批培养 1、单一补料分批培养(P162) 是补料分批培养中的一种类型。 特点:补料一直到培养液达到额定值,中途不取出培养液。 间歇补料操作 连续补料操作 按操作方式 假定:S0、X0 分别为起始营养物和菌体的浓度,S为某时刻底物浓度 则:某一时刻培养液中细胞浓度X为 最大细胞浓度Xmax为: 此时,若以恒定F流加培养基,并保证Dμmax, 则:加入的限制性营养物会很快被消耗。 这表明,补料所引起的培养体系的基质浓度变化dS/dt=0,即: X增加,但X却不变,即: 若定义: 并将其微分,可得: 由B和C式可推出 μ=D 由A、B、C式推出:补料分批培养数属半稳恒状态,与恒定状态μ=D不同。即, 在半稳恒状态下有: 明确半稳定状态补料分批培养: (1) 须满足μ=D (2) D是变化量。 2、补料分批培养的应用 优点: 解除底物抑制、反馈调节作用; 较少菌体生成,提高底物转化率; 方便调节pH和菌体所处时期的控制; 应用: 多种产品 -------------式(10-7) -------------式(10-13) 由10-11、10-12式可得: 同时,前面可知 由(10-13)和(10-7)式可得 有: 4、ATP对菌体的得率YATP及ATP平衡 两种情况 (1)能量偶联型生长型 YATP=10(g菌体/molATP) (2)能量非偶联型生长 YATP10(g菌体/molATP) (???) 第二节 微生物生长代谢过程数学模型的建立 一、连续培养时微生物生长数学模型 酶反应服从米氏方程: 葡萄糖的比消耗速率与限制性底物浓度的关系也类似于米氏方程,即: 式中:νmax—葡萄糖最大的消耗比速; KS—饱和常数; 式(1) 研究发现: 微生物连培养过程限制性基质浓度的倒数1/[S]与微生物生长比速的倒数1/ν的关系,如图10-9; 限制性浓度与微生物生长比速的关系呈现饱和曲线,如图所示10-10; 由基质消耗对细胞得率YX/S定义: 有: 根据μ的定义有: 该式就是Monod方程, 式中: μmax:最大比生长速率(h-1)。 KS:为饱和常数,表示菌体对基质的亲和力的大小。 Monod式的生物学意义: 1、μmax、KS: (1) 特定M,特定条件, μmax、KS是定值,体现M的特性; (2) 不同M,μmax、KS不同,但:μmax变化小,而KS变化大。 (3) 同种M,在不同S中,μmax、KS值不同。KS ↑,亲和力↓,M对基质越不敏感;反之亲和力大,敏感。 2、S浓度变化对μ的影响 (1)S很小(SKS)时,S+KS≈KS, (2)当S增大, μ与S渐不成正比;当(SKS)时, KS+S≈S ,μ=μmax。 ,μ与S成正比。 (3)双倒数后,实验并作图可求得KS、μmax。 限制性基质浓度与微生物生长比速之间的关系 斜率 Monod方程式双倒数图 微生物生长这一酶反应,同样存在抑制作用。 竞争性抑制: 非竞争性抑制: 图10-11,图10-13所示。 二、分批培养时微生物生长数学模型 分批培养特点:一次接种,培养一定时间,一次放罐。 设:种子罐开始细胞浓度为X0,在1小时内有部分细胞分裂(一分为二),假定分裂率为μ。 则:每小时能分裂的细胞数为:μX0 未分裂的细胞数为:(X0-μX0) 所以,经过1小时后细胞浓度X1: X1=[X0-μX0]+2μX0= X0(1+μ) 经过2小时后细胞浓度X2: X2=(X1-μX1)+2μX1= X1(1+μ) =X0(1+μ)(1+μ)=X0(1+μ)2 … 类推:经过t小时后,细胞浓度Xt: Xt= X0(1+μ)t 应用极限方式,有: 亦即: X1=X0(1+ε)ξ X
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