附子配伍对正常小鼠心电图.docVIP

瓜蒌、附子配伍对正常小鼠心电图、心肌MDA的影响 吴舟峰 张圣璎 龚帆 姚琼 周清 指导老师：张伟荣 上海中医药大学2005级中医临床七年制，201203 [摘要] 目的：观察十八反中瓜蒌、附子配伍使用对正常小鼠心电变化、心肌组织MDA的影响，探讨两者合用对心脏功能是否产生或增强毒性作用，为临床安全有效使用提供实验依据。方法：选用昆明种清洁级小鼠100只，体重18-22g，雌雄各半，随机分成10组，每组10只。取140g附子，140g瓜蒌，60g附子，加适量水浸泡半小时，附子单煎连续煮沸2小时，瓜蒌煮沸半小时，60g附子先煮沸90分钟，再加入80g瓜蒌煮沸半小时。煎煮完，最终浓缩或稀释成含生药0.25g/ml的药液。按照分组给药：空白组饮用水0.2ml、小剂量附子组0.39g/kg、小剂量瓜蒌组0.52g/kg、小剂量附子瓜蒌组0.91g/kg、常规附子组1.17g/kg、常规瓜蒌组1.56g/kg、常规附蒌组2.73g/kg、大剂量附子组3.51g/kg、大剂量瓜蒌组4.68g/kg、大剂量附蒌组8.91g/kg，各药物组剂量为70kg成人单位体重用量的9.1倍。药物灌胃每天1次，连续7天后，进行麻醉心电图测定，I、Ⅱ、Ⅲ、aVR、aVL、aVF导联的心电图进行分析，处死小鼠取出心脏，测定心肌组织丙二醛（MDA）含量。结果：从各组心电变化与心肌组织丙二醛（MDA）的含量的比较，小剂量（附子3g、瓜蒌4g）、常规用量（附子9g、瓜蒌12g）、大剂量（附子27g、瓜蒌36g）三个剂量水平，同一比例（附子：瓜蒌=3：4），附蒌合用组与单味组之间没有明显差异（P0.05）。我们初步认为本实验中的附子、瓜蒌合用并没有产生心脏毒性，从小鼠心脏功能方面来说，附蒌合用不存在相反作用。 [关键词] 瓜蒌；附子；小鼠；心电图；丙二醛（MDA） 瓜蒌反附子为中药“十八反”配伍禁忌，笔者通过查阅文献资料发现，临床上同用瓜蒌与附子的实例屡见不鲜，并取得了良好的治疗效果，并未出现不良反应。 瓜蒌与附子合用是否产生或者增强毒性呢?两者同为临床治疗心脏疾病的常用药，故本实验就选取心电图和心肌丙二醛（MDA）为观测指标，探讨两者配伍对正常小鼠心脏功能的影响。 1．材料与方法 1．1实验动物 健康昆明种清洁级小鼠100 只，体重18-22g，雌雄各半，上海中医药大学动物实验中心提供。 1．2药物 清炒瓜蒌皮、清炒瓜蒌子，购自上海康桥中药饮片有限公司，产地山东；熟附片，购自上海康桥中药饮片有限公司，产地四川；瓜蒌由瓜蒌子与瓜蒌皮以2：1剂量比组成。 各药物组：小剂量附子组（3g）、小剂量瓜蒌组（4g）、小剂量附蒌组（附子3g、瓜蒌4g）、常规附子组（9g）、常规瓜蒌组（12g）、常规附蒌组（附子9g、瓜蒌12g）、大剂量附子组（附子27g）、大剂量瓜蒌组（36g）、大剂量附蒌组（附子27g、瓜蒌36g）。 140g附子，140g瓜蒌，60g附子，分别放入三个不锈钢锅，加适量水浸泡半小时，附子单煎连续煮沸2小时，瓜蒌煮沸半小时，60g附子先煮沸90分钟，再加入80g瓜蒌煮沸半小时[1]。煎煮完，水浴浓缩或者加开水稀释成含生药0.25g/ml的药液，冷却后放入冰箱4℃冷藏， 1．3主要仪器与试剂 1．3．1心电图 心电图机，型号ECG6511，上海光电医用电子仪器有限公司生产；4.5号注射器针头作为电极； 1%戊巴比妥钠溶液作麻醉剂。 1．3．2心肌丙二醛（MDA）与考马斯亮蓝蛋白测定 丙二醛测定试剂盒、考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒，南京建成生物工程研究所生产。 匀浆机，漩涡混匀器，恒温水浴箱；DL-50RC低温离心机，上海中科生物医学高科技开发有限公司生产；UV-2100型分光光度仪，尤尼柯仪器有限公司生产。 1．4实验方法 1．4．1分组与给药 健康昆明种小鼠100 只，体重18-22g，雌雄各半，常规饲养一周后，随机分为10组，每组10只。各组给药方法如下：空白组饮用水0.2ml、小剂量附子组0.39g/kg、小剂量瓜蒌组0.52g/kg、小剂量附蒌组0.91g/kg、常规附子组1.17g/kg、常规瓜蒌组1.56g/kg、常规附蒌组2.73g/kg、大剂量附子组3.51g/kg、大剂量瓜蒌组4.68g/kg、大剂量附蒌组8.19g/kg，各药物组剂量为70kg成人单位体重用量的9.1 各组小鼠药物灌胃，每日1次，连续7天，期间小鼠常规喂养。灌胃后，观察小鼠反应症状，毛色，死亡情况等。 1．4．2心电图测定[2] 各组小鼠连续7天灌胃以后，第8天进行心电图测定。 选择安静整洁的实验室，打开心电图机，预热5分钟，调好基线，稳定后待用。 将各组小鼠依次用1％戊巴比妥钠按体重10mg/g（根据预实验得到），腹腔注射麻醉。 待小鼠入睡后，取仰卧位，过15分钟后测心电图