猪圆环病毒病ppt课件.pptVIP

（二 ）多病原疾病 （三）PCV致病性及危害 1、PCV可在猪源细胞培养物上繁殖，不产生CPE，易被忽视，因此对猪源细胞疫苗或诊断抗原生产造成潜在的危害。 2、PCV-2多数情况下引起亚临床感染，但如与其他病原如PPV等混合感染或环境应激情况下则可直接发生PMWS。 3、PCV-2的靶细胞 为淋巴细胞，主要是巨噬细胞、B细胞，病毒感染后引起细胞凋亡，使机体免疫抵抗力下降，从而继发感染其他病原体，包括PRRSV、PPV、PRV和猪链球菌等，引起更严重的疾病。 （四）该病主要表现： 侵害：淋巴系统、呼吸道、黄疸 日龄：6-8周龄仔猪 影响：免疫机能下降、生产性能降低、 渐进性体重下降 （五）病原体 猪圆环病毒 2型（PCV-2） 圆环病毒有两种血清型:PCV-1和PCV-2 PCV-2基因组及编码蛋白示意图 PCV-1与PCV-2 PCV-1：最初是从猪肾传代细胞系PK-15分离到，动物感染试验表明此PCV无致病性。该病毒可长期持续污染PK-15，不产生细胞病变 。 PCV-2：PCV-2是PMWS的主要病因（但不是唯一的病原）。 二、PCV-2毒株的分离鉴定 病料处理（将PCR扩增阳性的组织病料用氯仿抽提去除有曩膜的病毒，如PRRSV） 接种细胞—PK-15盲传10代（300mmol/L的D-氨基葡萄糖处理） 间接免疫荧光实验及电镜观察病毒颗粒 病毒粒子电镜照片 三 复合PCR方法的建立 1、引物设计 引物1（为PCV-1、2共同序列）： 5’-CCGCGGTGGCTGAACTT-3’（PCV-1 nt478-496；PCV-2 nt491-519）； 引物2（PCV-1特异序列）： 5’-CTCGGCTATGCGCTCCAAAATG-3’（PCV-1 nt1108-1129）； 引物3（PCV-2特异序列）： 5’-ACCCCCGCCACGTACC-3’（PCV-2 nt1627-1644） 引物1、2扩增的片段长度为652bp（ PCV-1 ），引物1、3之间的跨幅为1154bp（PCV-2）。 2、复合PCR方法的初步用 1）对多株猪源传代细胞（包括4株PK-15及1株ST细胞）进行了PCV检测，发现所有细胞均污染有PCV-1，其中一株还扩增出了PCV-2基因片段； PCV流行病学 * * 南京农业大学 陈溥言 圆环病毒病 断奶仔猪多系统消耗综合征(postweaning multisystemic wasting syndrome，PMWS)是一种新的猪传染病,主要侵害6-8周龄仔猪，引起淋巴系统疾病、渐进性体重下降、呼吸道症状及黄疸，造成患猪免疫机能下降、生产性能降低，给养猪业带来了很大的经济损失。该病1991年首次报道于加拿大，而后美国、法国、西班牙、意大利及墨西哥等美洲和欧洲国家相继报道此病的发生。我国中监所郎洪武等证实国内存在此病。最近研究表明PMWS的发生与一种猪圆环病毒（porcine circovirus，PCV）的感染有关。 （一） 概况 断奶仔猪多系统消耗综合症 PCV-2是PMWS的主要病因，但并不是唯一的病原。PMWS很可能是PCV和PPV、PRRSV等病原混合感染的结果。Alian等（1999）、Kennedy等（2000）、Krakowka等（2000）利用PPV和PCV-2共同感染未经母乳哺育的仔猪或悉生仔猪，成功复制出典型的PMWS症状及病变，但单独使用PCV-2实验感染，只能产生轻微的症状。同时也有学者将PMWS病死猪组织悬液感染仔猪，仔猪出现典型PMWS症状，而且可从病变组织中分享出PCV-2和PPV，血清中可检测到两者的抗体。因此可以认为PPV在PMWS疾病发生中起着重要作用，或者说PMWS就是两者共同感染的结果。 另外，PRRSV可以从一些已感染或正在感染PMWS的猪体内分离到。因此，有人认为PMWS是多病原疾病，可能是PCV与PRRSV、PPV等多种病原混合感染的结果。 PCV-1基因组全长1759bp；PCV-2为1768bp。两者的基因组核苷酸序序列同源性仅为68~75%。 PCV-1、PCV-2都主要包含ORF1、ORF2两个阅读框。ORF1编码与病毒复制相关的Rep蛋白，ORF编码病毒的核衣壳蛋白，具有良好的免疫原性。 PCV-1无致病性，广泛存在猪源细胞及正常猪体内各组织；PCV-2现证明与断奶仔猪多系统消耗综合症（PMWS）、猪皮炎肾病综合症（PDNS）及A2型先天性综合征相关。 接种病料的PK-15的IIF结果 未接种病料的PK-15的IIF结果 （卢银华） 本实验室共分离了5株PCV-2，根据其分离地将其分别命名为sh