细胞增殖及其调控ppt课件.ppt

细胞增殖的意义 ◆细胞增殖(cell proliferation)是细胞生命活动的重要特征之一,是生物繁育的基础。 ◆单细胞生物细胞增殖导致生物个体数量的增加。 ◆多细胞生物由一个单细胞即受精卵分裂发育而来，细胞增殖是多细胞生物繁殖的基础。 ◆成体生物仍然需要细胞增殖，主要取代衰老死亡的细胞，维持个体细胞数量的相对平衡和机体的正常功能。 ◆机体创伤愈合、组织再生、病理组织修复等，都要依赖细胞增殖。 细胞周期可分为间期和分裂期。 分裂间期包括 G1、S、 G2三个时期。 高等生物细胞周期长短主要差别在G1期。 二、细胞周期中各个不同时相及其主要事件 2. 流式细胞分选仪测定法 流式细胞仪是一种快速测定和分析流体中细胞或颗粒物各种参数的大型实验仪器。 原理： G1期细胞的DNA含量为1C (C表示细胞内一套染色体的DNA含量 )，DNA分子的数目为2n， G2/M期细胞的DNA含量为2C(4n)， S期细胞的DNA含量介于二者之间。 3.缩时摄像技术 可以得到准确的细胞周期时间及分裂间期和分裂期的准确时间。 条件突变同步化 将分离出的与细胞周期调控有关的条件依赖性突变株转移到限定条件下培养，所有细胞便被同步化在细胞周期某一时相。 （二）与有丝分裂有关的亚细胞结构 1、中心体 ◆是一种与微管组装和细胞分裂密切相关的细胞器。由一对位于中央的中心粒和周围的无定形物组成。 ●中心粒确定分裂极 ●形成纺锤体 2、动粒与着丝粒 动粒是附于着丝粒上的一种细胞结构，而着丝粒则是指染色体主缢痕部位的染色质。 3、纺锤体 ◆纺锤体是一种与染色体分离直接相关的细胞装置，又称为有丝分裂器。 (mitotic apparatus) ●Kinetochore microtubules ●Polar microtubules ●Astral microtubules 一个性原细胞有n对同源染色体，进行减数分裂时，如果在四分体时期染色体不发生交叉互换，则可产生2n种配子 ，若其中有m对发生了交换，则可产生2n+m种配子。 人的体细胞中有46条染色体。计算前减数分裂间期的两个时相、减Ⅰ末期和减Ⅱ末期细胞中的染色体、DNA、同源染色体的数目。 三、裂殖酵母P34cdc2激酶的发现及其与MPF的关系 以Hartwell为代表的酵母遗传学家发现了获得了数十个芽殖酵母的温度敏感突变株。 温度敏感突变株在允许温度（20-23℃）条件下正常繁殖；在限定温度（30-35 ℃）条件下不能正常裂殖。 P. Nurse 等酵母生物学家发现了数十个温度敏感型的裂殖酵母突变株。 温度敏感突变株的失去正常分裂能力是由于某个基因发生突变而引起。 酵母中这些与细胞分裂和细胞周期调控有关的基因称为cdc (cell division cycle) 基因。 Cdc2基因是裂殖酵母中最重要的基因之一。 Cdc2基因突变导致细胞停留在G2/M交界处。 Cdc2基因的表达产物是相对分子量为34的蛋白质，称为P34 cdc2。 P34 cdc2具有激酶活性，可以使许多蛋白底物磷酸化。 P34 cdc2本身没有激酶活性，必须与另一种蛋白P56结合后，才具有激酶活性。 P34cdc2与MPF都能促进G2/M期转换，二者有何关系？ James Maller 实验室和Paul Nurse 实验室合作证明: MPF 中的P32可以被P34cdc2特异抗体所识别。说明： 二者为同源物。 Tim Hunt 实验室发现在海胆卵细胞中发现了细胞周期蛋白。 周期蛋白B为诱导细胞进入M期所必需。 James Maller和Tim Hunt 实验室合作证明MPF中的P45蛋白即为周期蛋白B。 生长因子刺激G1期cyclinD表达。 cyclinD与CDK4、CDK6结合，使Rb磷酸化。 磷酸化的Rb释放出转录因子E2F。 E2F促进cyclinE、A基因的转录。 cyclinE/ CDK2启动中心体的复制， cyclinA/CDK2启动DNA复制。 到达S期的一定时期，G1期周期蛋白通过泛素化途径降解。 由SCF控制的蛋白泛素化降解 靶蛋白（如CKI）的磷酸化，导致该蛋白被SCF所识别。在泛素激活酶E1和泛素结合酶E2的帮助下， SCF将多个泛素分子转移到靶蛋白上。泛素化的靶蛋白（ CKI）立即被蛋白酶体识别并降解。 由APC控制的蛋白泛素化降解 M期周期蛋白的泛素化是由APC完成的。 APC在有丝分裂后期，由于一个活性亚基的加入而被激活。在泛素激活酶E1和泛素结合酶E2的帮助下，将泛素分子连接到M期周期蛋白上，导致其被蛋白酶体降解。 （一）G2/M期转化与CDK1的关键性调控 （二）M期周期蛋白与分裂中期向后期转化 （三）G1/S期转化与G1期CDK （四）DNA复制延搁检验点参与调控S/G2/M期转化 W