大豆脱臭馏出物中生育酚及甾醇单体的分离纯化.pdfVIP

摘 要 大豆油脱臭馏出物是制备天然生育酚和植物甾醇的主要原料。大豆生育酚 由 α- ，β- ，γ-和 δ-生育酚四种单体组成，其中 α-生育酚生物活性最强，其研究 报道最为广泛，具有预防心血管疾病、消炎、保护肺部、防辐射、保护神经系 统、抗癌等作用。目前高纯度 α-生育酚已广泛用于功能性食品和医药行业，随 着人们对非 α-生育酚单体特殊生理作用的认识不断加深，将会引发其用于药物、 功能食品等方面的研究热潮。大豆植物甾醇由 β-谷甾醇、豆甾醇、菜油 甾醇和菜籽甾醇等单体组成。植物甾醇具有十分重要的生理功能－降低胆 固醇、降低心脏病的发生率、抗癌和抗炎等作用。随 着 植 物 甾 醇 单 体 在 医 药 工 业 上 的 进 一 步 应 用 ， 对 高 纯 度 植 物 甾 醇 单 体 的 需 求 量 也 大 幅 上 升，特别是豆甾醇的商业需求越来越大。 因此，如何将混合大豆生育酚和植物甾醇分离成单一产品，并提 高 其 纯 度 和 收 率 ， 是 当 前 大 豆 生 育 酚 和 植 物 甾 醇 分 离 精 制 研 究 的 热 点 。 分 离 纯 化 逐 渐 成 为 影 响 大 豆 生 育 酚 和 植 物 甾 醇 单 体 研 究 的 关 键 因素。 本 论 文 针 对 我 国 生 育 酚 和 植 物 甾 醇 的 利 用 现 状 ， 主 要 以 大 豆 天然 生 育 酚 和 植 物 甾 醇 为 被 分 离 对 象 ， 从 制 备 方 法 入 手 ， 研 究 出 分 离 纯 化生育酚单体和植物甾醇单体的制备分 离方法。主要研究内容如下： 1. 将低压柱色谱分离技术用于 α-生育酚，γ-生育酚和 δ-生育酚单体的分离 纯化工作。以天然维生素 E 浓缩液（ 53% 纯度，从大豆油脱臭馏出 物中获得）为原料制备分离获得天然 α-生育酚，γ-生育酚和 δ-生育酚 II 单 体 。 考 察 了 洗 脱 剂 比 例 ， 流 速 和 上 样 量 单 因 素 对 分 离 效 果 （ 以 纯 度 和 回 收 率 作 为 评 价 指 标 ） 的 影 响 。 在 单 因 素 的 基 础 上 采 用 正 交 实 验 和 统 计 学 方 法 对 色 谱 参 数 进 行 了 优 化 。 最 佳 分 离 条 件 为 环 己烷－乙醇（99.7 :0.3 ，v/v ），样品进样体积为 2ml ，洗脱剂流速 为 25ml/ min 。在此条件下得到的 α-生育酚，γ-生育酚和 δ-生育酚各单 体 产 品 的 纯 度 分 别 92.35%, 91.23%, 89.95% ； 回 收 率 分 别 为 35.21% ， 36.25% ， 61.25% 。 2. 研究了从大豆混合植物甾醇中用结晶法提取高纯度豆甾醇和 β- 谷甾醇 的工艺条件。测定了β- 谷甾醇和豆甾醇在环己酮中的溶解度数据，利 用β- 谷甾醇和豆甾醇在环己酮中的溶解度随温度变化的差异，分别用 重结晶法提纯了β-谷甾醇和豆甾醇，并对豆甾醇 的结晶条件（料液比、 结晶温度和养晶时间）进行了优化。实验结果表明：经过 4 次结晶操作， β-谷甾醇的纯度可达到 90 ％左右；豆甾醇结晶过程中采用料液比（混 合植物甾醇与环己酮的比，g/ml ）为 1 :3.3 、结晶温度 25 ℃、养晶 5h 的 条件，经 5 次结晶操作后所得豆甾醇的纯度达到 96 ％左右。 3. 以大豆混合植物甾醇为原料，采用低压柱色谱法对 β-谷甾醇和豆甾醇单 体的分离进行了探索研究。以硅胶为分离介质，采用甲醇－异丙醇－水 洗脱剂体系对 β-谷甾醇和豆甾醇单体的分离是可行的。使用甲醇－异丙 醇－水（ 85 :5 :10 ，v/v/v ）时 β- 谷甾醇和豆甾醇单体的回收率分别为 53.6% 、48.2% ，纯度分别为 84.3% 、74.4% 。 关键词 ：生育酚单体，植物甾醇单体，分离，纯化 III ABSTRACT Soybean oil deodorizer distillates