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《分子生物学实用技术》 抗 体 技 术 李 官 成 中南大学肿瘤研究所 2012-5-7 免疫学的科学早期 (19世纪中叶-1912年) 血清疗法： 1890年德国的贝林(Emil von Behring)和同事日本学者北里柴三郎(Kitasato)用白喉及其破伤风外毒素免疫动物，所获得动物血清可中各或破坏其毒素作用，并且可预防由毒素所导致疾病的发生。随后，被称之为“抗血清”。 埃利希. P. (Paul Ehrlich, 1854-1915)德国细菌学家、免疫学家 1908年获诺贝尔生理学及医学奖 最早用化学反应解释免疫过程。第一个定量地研究了毒素与抗毒素的沉淀反应，建立起抗体理论。由于他的研究，后来科学家才开始使用“免疫化学”这个名词，因此他被誉为免疫化学的先驱。 埃德尔曼.G.M. (Gerald Maurice Edelman, 1929-)美国生物化学家 1972年获诺贝尔生理学及医学奖 主要阐明了抗体分子结构，对生物化学和免疫学研究作出了重大贡献。 1969年4月，在美国实验生理学学会联合会第53次年会上，Edelman正式宣布：自己已解决抗体分子最详尽的化学结构即其氨基酸序列问题。与会者一致认为：这项研究成果“是解决抗体分子三维结构问题至关重要的一个步骤，是一项重大成就，它必将对进一步了解抗体的功能发挥巨大的作用。 （一）抗体的发现 早在19世纪后期，Behring和Kitasato就发现用白喉或破伤风毒素免疫动物后产生一种可以中和毒素的物质，称之为抗毒素（antitoxin）。后引入“抗体”一词泛指抗毒素类物质。 1939年Tiselius和Kabati证实抗体为球蛋白。 1968年和1972年世界卫生组织和国际免疫学会联合会的专门委员会先后决定：将具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白统称为免疫球蛋白（immunoglobulin, Ig）。 免疫球蛋白可分为分泌型（secreted Ig, SIg）膜型（membrane Ig, mIg）两种。Sig存在于备注及组织洲中，具有抗体的各种免疫功能；mIg是B细胞表面的抗原受休。 抗体生成理论 1897年 侧链学说 1930年 模板学说 1941年 间接模板学说 1955年 自然选择学说 1958年 克隆选择学说 （二）抗体的结构 (1) 重链（heavy chain，H） 2条 轻链（light chain，L） 2条 (2) 可变区（variable region, V区） 恒定区（constant region, C区） (3) 超变区（ hyper-variable region, HVR), 又称互补决定区(complementary determining region, CDR） 骨架区（framework region, FR） (4) 铰链区（hinge region） 可变区恒定区（Variable and constant regions） Hypervariable region, HVR (1, 2, 3) (高可变区) Framement region, FR (1,2,3,4) (骨架区) Complementarity –determining region, CFR (1,2,3) (互补决定区) Antigen-binding site (抗原结合部位) （三）抗体的功能区 Ig的多肽链分子可折叠成几个由链内二硫键连接的球形结构，每个球形结构由约110个氨基酸残基组成，并代表一个功能区。 （四）抗原抗体结合的基础 抗体对抗原的结合是一种典型的特异性免疫结合，抗体结合抗原的部位位于Fab片段可变区结构域中的CDR区。 （五）抗体基因的遗传控制 完整的抗体分子由轻链（包括κ和λ）基因和重链基因 编码。 编码一条免疫球蛋白多肽链的基因是由胚系中分隔开的 基因片段经重排而形成的。即免疫球蛋白的可变区和恒 定区是由分隔存在的基因所编码，在淋巴细胞的发育过 程中，这两个基因因为发生易位而重排在一起形成编码 完整免疫球蛋白分子的基因。 （六）抗体多样性机制 （1）编码Ig基因的多样性 （2）体细胞突变 （3）V、D、J基因连接的多样性