ATP生物荧光肿瘤体外药敏检测技术(ATP-TCA)的建立及其临床应用研究PPT.pptVIP

ATP生物荧光肿瘤体外药敏检测技术(ATP-TCA)的建立及其 临床应用研究;答辩提纲;第一部分;研究背景;1. 主要的药敏检测方法及其存在的问题;2. ATP生物荧光药敏检测技术的优点:; 3. ATP-TCA技术原理：;荧光强度与活细胞数量的关系;4.技术流程;5.适用肿瘤类型;7. 国内外研究历史回顾 ;时间 ;ATP-TCA与其它药敏检测方法的相关性;8.目前先进国家对该技术的评价;第二部分;ATP-TCA技术的核心试剂 1. 荧光酶试剂 热稳定性和发光效率均好的重组酶试剂保证检测的敏感性和可 靠性，满足临床实际工作的需要 2. 培养基 肿瘤细胞选择性培养基支持肿瘤细胞生长增殖，促进正常细胞 死亡，从而保证药敏检测的肿瘤细胞特异性 ;● 荧光酶基因克隆、点突变、表达及纯化(2001,4－2001,10) ● 肿瘤细胞选择性培养基配方筛选及优化(2001,5－2001,12) ● 检测技术核心试剂的质量标准的建立(2002,1－2002,3);自荧火虫体内发光腺体提取荧光酶mRNA;荧光酶基因的克隆和鉴定;野生型荧光酶基因编码序列(1653bp);荧光酶基因突变位点测序图; 荧光酶表达电泳图 纯化后电泳图;图1：野生型和突变型荧光酶热稳定性比较;重组荧光酶制剂稳定性研究;肿瘤细胞选择性培养基研究;选择性培养基生长支持度及选择性研究; 新鲜瘤组织体外培养效果图;Continued;卵巢癌原代培养前后HE及免疫组化染色;正常卵巢上皮细胞及成纤维细胞 培养结果;;质量标准;第三部分 ATP-TCA体外药敏检测技术的临床应用研究; ATP-TCA 药物测试方式;评价标准 强敏感(SS)：IC5025%及IC90100%PPC 中度敏感(IS)：IC5025%及IC90100%PPC 轻度敏感(MS)：IC5025%及IC90100%PPC 耐药(R)：IC5025%及IC90100%PPC IC90:抑制90%肿瘤细胞生长的血浆峰值浓度百分比 IC50:抑制半数肿瘤细胞生长的血浆峰值浓度百分比 PPC:一定临床用药剂量对应的血浆峰值浓度 ;临床相关性研究病人资料; ; ;ATP-TCA药敏检测的临床应用;一例经多重化疗复发的睾丸癌病人药敏检测结果;检测结果分析;治疗效果;2. 卵巢癌新的联合用药方案研究; 羟基喜树碱 (Hydrocamptocin) 原用途：消化道和泌尿系肿瘤 ; 长春瑞宾(Vinorelbine, Navelbine) 原用途：非小细胞肺癌、转移性乳腺癌 ;讨论;研究总结;发表论文;致谢;Enjoy the flashes sparkling the night; ;;;卵巢癌原发部位、大网膜转移及腹水药敏检测结果;结果评价;联合用药方案效果评估 ;ATP-TCA与MTT法的相关性;两种方法测定的IC50值