酵母基因工程医学课件.ppt

利用重组酵母生产乙肝疫苗 由乙型肝炎病毒（HBV）感染引起的急慢性乙型肝炎是一种严重 的传染病，每年约有200万病人死亡，并有3亿人成为HBV携带者，其 中相当一部分人可能转化为肝硬化或肝癌患者。目前对乙型肝炎病毒 还没有一种有效的治疗药物，因此高纯度乙型疫苗的生产对预防病毒 感染具有重大的社会效益，而利用重组酵母大规模生产乙型疫苗为其 广泛应用提供了可靠的保证。 产乙肝表面抗原的重组巴斯德毕赤酵母 整合型重组巴斯德毕赤酵母的构建 PARS2 Bgl II 5’ AOX1 HBsAg PHIS4 3’ AOX1 Bgl II pBSAG151 11 kb Bgl II 5’ AOX1 HBsAg PHIS4 3’ AOX1 his+的转化子 重组分子 转化his-的受体细胞 染色体DNA 产乙肝表面抗原的重组巴斯德毕赤酵母 由于巴斯德毕赤酵母染色体DNA上还拥有第二个乙醇氧化酶基因 AOX2，所以整合型重组菌仍能在含有甲醇的培养基上生长。 重组菌首先在含有甘油的培养基中培养，待甘油耗尽后，加入甲 醇诱导HBsAg表达，最终S蛋白的产量可达细胞可溶性蛋白总量的3% 在大规模的生产过程中，巴斯德毕赤酵母工程菌在一个240L的发酵罐 中培养，最终可获得90克22nm的HBsAg颗粒，足够制成900万份乙肝 疫苗。 酵母基因工程 第一节 酵