微流体装置线性去除猪MⅡ期卵母细胞冷冻保护剂的实验研究.pdfVIP

36卷4期 中 国 生 物 医学工程学报 V01．36No．4 2017 August Chinese Biomedical 2017年8月 Journalof Engineering 微流体装置线性去除猪MII期卵母细胞冷冻保护剂的实验研究 周新丽¨ 杨 云1 戴建军2 张德福2 邵文琪1 衣星越1 陶乐仁1 1(上海理工大学生物热科学研究所，上海200093) 2(上海市农业科学院畜牧兽医研究所，上海201106) 摘要：低温保存后的卵母细胞在使用前必须要去除冷冻保护剂，目前常用的分步法去除步骤繁琐，容易丢失细 胞，而且会对细胞造成致命的渗透损伤。为减小细胞渗透损伤，设计制作适合卵母细胞保护剂去除的微流体装置， 研究微流控线性法去除猪MII期卵母细胞低温保护剂时在不同时间(6、8、10min)下卵母细胞的体积变化，以及对 卵母细胞存活率与发育率的影响；并与传统的去除方法(一步法和分步法)进行比较。结果表明，采用微流体装置 线性去除冷冻保护剂，8min为实验中的最优去除时间；线性法能够明显减小细胞的渗透损伤，其最大归一化渗透 膨胀体积为1．12±0．07，卵母细胞的存活率、卵裂率及囊胚率分别达到83．6％、72．4％、21．5％，均显著高于一步法 和分步法(P0．05)。因此，微流控线性去除冷冻保护剂能够显著减小细胞的渗透损伤，为卵母细胞低温保存技术 提供新思路。 关键词：微流体；混合；卵母细胞；冷冻保护剂；渗透损伤 中图分类号：R318 文献标志码：A 文章编号：0258—8021(2017)04—0442-07 ofLinear from ExperimentalStudy RemovingCryoprotectiVeAgents MIIPorcine withMicrofluidicsDevice Oocytes Shao Yi TaoLerenl ZhouXinlil+ YunlDai Defu2 Yang Jianjun2Zhang WenqilXingyuel Biothermal Scienceand 1(Instituteof ofShanghaifor Technology，Shanghai200093，China) Technology，University and Research 2(AnimalVeterinary Institute，ShanghaiofAgricultural 20t106，China) Academy Sciences，Shanghai beremovedfrom beforeusedinclinic． Abstract：Cryoprotectiveagents(CPAs)mustcryopreservedoocytes