单头赤眼蜂DNA提取方法比较及其PCR反应体系优化-生物探索.PDFVIP

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2018-10-01 发布于天津
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单头赤眼蜂DNA提取方法比较及其PCR反应体系优化-生物探索.PDF

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沈阳农业大学学报，，： 2011－04 42(2) 170-174 ，，： Journal of Shenyang Agricultural University 2011－04 42(2) 170-174 单头赤眼蜂DNA 提取方法比较及其PCR 反应体系优化柳晓利，董辉，丛斌，张柱亭，冮爽 * （沈阳农业大学植物保护学院，沈阳 110161）摘要：为了探明有效的基因组DNA 提取方法和PCR 反应体系，从而得到符合分子生物学实验要求的基因组 DNA 模板的数量和质量，以单头松毛虫赤眼蜂为材料，应用 CTAB 法、SDS 法和 Chelex 法进行基因组DNA 提取效果的比较，并将核酸助沉剂用于赤眼蜂的提取中，然后将提取的基因组采用 5 正交设计试验，对影响赤眼蜂基因组反应体系的因素 DNA DNA L16(4 ) DNA PCR 5 2+浓度、浓度、引物浓度、模板、聚合酶水平进行筛选。结果表明：法优于法和法，且核酸 (Mg dNTPs DNA Taq )4 CTAB SDS Chelex 助沉剂的加入明显增强了模板 DNA 提取效果。同时确立的ITS2 的PCR 优化反应体系为：总体积为25mL ，Mg2+浓度为 1.50mM, 浓度为，引物浓度为，模板取，聚合酶量为。 dNTPs 0.25mM 0.30μM DNA 2.00μL Taq 2.00U 关键词：赤眼蜂；提取；核酸助沉剂；正交设计；体系优化 DNA PCR 中图分类号：文献标识码：文章编号：（） S476.3 A 1000-1700 2011 02-0170-05 DNA Extraction of Single-head Trichogramma and PCR System Optimization LIU Xiao-li ， DONG Hui ， CONG Bin* ， ZHANG Zhu-ting ， GANG Shuang (College of Plant Protection, Shengyang Agricultural University, Shenyang 110161, China) Abstract ： The CTAB method ，SDS method ，Chelex met