【doc】橙皮、柚皮、桔皮抗氧化活性物质的提取与保存条件优化.docVIP

橙皮、柚皮、桔皮抗氧化活性物质的提取与保存条件优化 第28卷第3期 2010年5月 北京工商大学(自然科学版) JournalofBeijingTechnologyandBusinessUniversity(NaturalScienceEdition) V01.28No.3 Mav2010 文章编号:1671—1513(2010)03.0044—04 橙皮,柚皮,桔皮抗氧化活性物质的提取与 保存条件优化 张晓娟,祝钧 (北京工商大学化学与环境工程学院/食品添加剂与配料北京高校工程研究中心,北京100048) 摘要:实验提取了橙皮,柚皮和桔皮中的活性物质,以DPPH自由基清除能力和羟基自由基抑制 能力为考察指标,分析比较了三者的抗氧化能力,并通过正交试验优化了其提取工艺和保存温度. 结果表明,3种果皮中桔皮在pH值为3的70%乙醇的溶液中,以料液比为1:20的条件下提取,提 取物保存于25℃,清除DPPH自由基和抑制羟基自由基的效果最佳. 关键词:橙皮;柚皮;桔皮;提取物;抗氧化 中图分类号:TS202.3文献标志码:A 抗衰老功能研究是当前功能性食品研究的 重要领域之一,根据衰老的自由基生物学理论发 展的抗氧化能力评价则是抗衰老活性添加物筛 选的主要依据¨.自由基在生物体内的代谢非 常复杂,其中羟基自由基是一种氧化能力很强的 自由基,容易氧化各种有机物和无机物,能够造 成生物组织脂质过氧化,核酸断裂,蛋白质和多 糖分解.如何从天然植物资源中筛选具有抑制羟 基自由基能力的活性物是当前的研究热点.甜 橙,沙田柚,芦柑均属于柑橘类植物,属于芸香科 (Rutaceae),柑橘亚科(Aurantioideae),柑橘族 (Citrea),柑橘亚族(Citrinae).因其果皮含有能 抗自由基和抗癌,防癌等的天然植物黄酮类 化合物而被报道得较多,但对于这3种果皮抗 氧化能力以及提取方法和保存方法的比较,目前 未见相关报道.本实验以不同工艺条件提取了3 种果皮中生物活性成分,对其进行了抗氧化测 试,在此基础上优化桔皮中抗氧化活性物质的提 取工艺和保存方法,为研制桔皮提取抗衰老活性 食品添加剂提供依据. 1实验部分 1.1试剂与仪器 从市场上购买甜橙,沙田柚和芦柑,剥皮,自然 风干后即为本试验所采用的橙皮,柚皮和桔皮. 结晶紫,FeSO,H:0,无水乙醇,乙酸乙酯, 磷酸氢二钠,磷酸二氢钠,氯化钠,DPPH(二苯代 苦味酰基自由基)均购自北京化学试剂公司,为 分析纯. UV2300型紫外分光光度计,水浴锅,分析天平, 中药粉碎机,漏斗,旋转蒸发仪,真空泵,THZ.C一1摇 床,水浴摇床. 1.2柑橘皮提取方法 称取粉碎过20目筛后的橙皮,柚皮,桔皮各10 g,加入一定量的溶剂,放于50℃恒温摇床(水提是 放于90℃水浴摇床)中浸提1h,过滤,将滤渣按同 样的方法再提取2次,合并3次滤液,在50℃下按 10:1的比例浓缩后,得到半透明状的橙红色液体,保 存待用.随后在正交试验设计的温度下保存7d后 进行相关指标的测定. 收稿日期:2010—04—20 基金项目:国家十一五科技支撑计划项目(2006BAD22B01);北京市科技新星项目(2007BO11) 作者简介:张晓娟(1983一),女,重庆人,硕士研究生,研究方向为杂环化合物的合成; 祝钧(1966一),男,陕西西安人,教授,主要从事有机化合物的合成研究通讯作者 第28卷第3期张晓娟等:橙皮,柚皮,桔皮抗氧化活性物质的提取与保存条件优化45 1.3DPPH自由基清除能力测定 参考BrandWilliams等的方法进行,略有改 进.反应体系为2mL0.1777mmol/LDPPH溶液和 0.1mL样品,充分混匀,30rain后在520nm处测吸 光度,记为A.以pH值为6.88标准磷酸盐缓冲溶 液替代DPPH的吸光度标记为..清除率=(1一 (1—0)/A0)×100%. 1.4抑制羟基自由能力测定 参考王友升等的方法进行,略有改进.反应 体系为0.5mL0.4mmol/L结晶紫,1.4mL0.2mol/ LPBS(磷酸氢二钠与磷酸二氢钠配制的缓冲溶液, pH值为7.4),0.5mL1mmol/LFeSO,0.1mL样 品,0.5mL6%HO:,样品混匀并静止1h后测量其 在584nm下的吸光度4,用蒸馏水代替样品时的吸 光度作为CK,用蒸馏水代替样品和H:0:时的吸光 度作为CK,羟基自由基抑制率=100%×((1一 (CK一A))/(CK,一CK)). 1.53种柑橘类果皮中生物活性成分提取条件 探讨 研究设计四因素三水平的正交试验L.(3),以 比较3种果皮中生物活性成分的差异性,以及不同 提取工艺条件对3种果皮巾生物活性成分的影响. 正交试验Lq(3)不同因素与水平的设计见表1. 表