08RNA的生物合成.pptVIP

RNA的生物合成包括转录和RNA的复制。 1.转录（transcription）：以一段DNA的遗传信息为模 板，在RNA聚合酶作用下，合成出对应的RNA的过程 (DNA指导的RNA合成）。 转录产物：mRNA 、rRNA、 tRNA、小RNA。 除某些病毒基因组RNA外，绝大多数RNA分子都来自 DNA转录的产物。 2.RNA的复制：有些RNA病毒，进入寄主细胞后，借助复 制酶（RNA聚合酶）以RNA病毒的RNA为模板而进行RNA 病毒的RNA复制合成。（ RNA指导的RNA合成）。 转录研究的主要问题 ①RNA聚合酶 ②转录过程 ③转录后加工 ④转录的调控 ①~③是基本内容，④是目前研究的焦点，转录是基因表达的 第一步，也是最关键的一步。转录水平的调控是基因调控的 核心。转录与DNA复制的异同： 相同：要有模板，新链延伸方向5’→3’，碱基的加入严格 遵循碱基配对原则。 相异:①复制需要引物，转录不需引物。 ②转录时，模板DNA的信息全保留，复制时模板信息 是半保留。 ③转录时，RNA聚合酶只有5’→3’聚合作用，无5’→3’及 3’→5’外切活性。 基因表达的终产物：①RNA ②蛋白质 转录过程涉及两个方面: ①RNA合成的酶学过程 ②RNA合成的起始信号和终止信号，即DNA分子上的 特定序列。 DNA正链：与mRNA序列相同的DNA链。 DNA负链：与正链互补的DNA链。 转录单位的起点核苷酸为+1，起点右边为下游（转录区）， 转录起点左侧为上游，用负数表示：-1，-2，-3。 RNA链的转录，起始于DNA模板的一个特定位点，并在另一 位点终止，此转录区域称为一个转录单位。一个转录单位可 以是一个基因（真核），也可以是多个基因（原核）。 基因的转录是有选择性的，细胞不同生长发育阶段和细胞环 境条件的改变，将转录不同的基因。 转录的起始由DNA上的启动子区控制，转录的终止由DNA 上的终止子控制，转录是通过DNA指导的RNA聚合酶来实现 的。 RNA聚合酶结合到DNA双链的特定部位（启动子区即RNA聚合酶识别 并结合和开始转录的基因中的一段DNA序列），局部解开双螺旋，第一 个核苷酸掺入转录起始位点，从此开始RNA链的延伸。 在新合成的RNA链的5’末端，通常为pppG或pppA，即合成的第一个底 物是GTP或ATP。因此RNA合成方向是5‘－3’，不需要引物。 起始过程中，σ因子起关键作用，它能使聚合酶迅速地与DNA的启动子 结合，σ亚基与β’结合时，β’亚基的构象有利于核心酶与启动子紧密 结合。还常需要一些起始因子参与。 正链（有意义链）：又叫编码链，5‘－3’。与mRNA序列相同的DNA 链。 负链（反意义链）：模板链，3‘－5’。 转录起点是+1，上游是-1。 转录的起点核苷酸为+1，起点右边为下游（转录区），用正数表示，起 点左侧为上游，用负数表示：-1，-2，-3。 转录起始后，σ亚基释放，离开核心酶，使核心酶的β’亚 基构象变化，与DNA模板亲和力下降，在DNA上移动速度 加快，使RNA链不断延长。 转录起始后，σ亚基便从全酶中解离出来，然后nusA亚基 结合到核心酶上，由nusA亚基识别序列。常需要转录因子 （ DNA转录中协助转录的辅助因子）参与。 以模板链为模板（ 3‘－5’），严格按照碱基配对原则，在 核心酶的催化下，合成RNA。 3、终止 RNA聚合酶到达转录终止点（终止子区即基因中提供转 录终子信号的DNA序列）时，在终止因子（DNA转录中协 助RNA聚合酶识别终止信号的辅助因子）的帮助下，聚合 反应停止，RNA链和RNA聚合酶脱离DNA模板链，nusA 又被σ亚基所取代。 由此形成RNA聚合酶起始复合物与终止复合物两种形式 的循环。 ★转录与DNA复制的异同： 相同：要有模板，新链延伸方向5’→3’，碱基的加入严格 遵循碱基配对原则。 相异：①复制需要引物，转录不需引物。 ②转录时，模板DNA的信息全保留，复制时模板 信息是半保留。 ③转录时，RNA聚合酶只有5’→3’聚合作用，无 5’→3’及3’→5’外切活性。 一、? DNA 指导的RNA聚合酶 E.coli和其它原核细胞只有一种RNA聚合酶，合成各种RNA（mRNA、 tRNA、rRNA）。 E.coli RNA聚合酶全酶（holoenzyme）分子量46万Da，由六个亚基组 成，α2ββ’ σω，另有两个Zn2+。不同的细菌，β’、β、α亚基分子 量变化不大，σ亚基分子量变化较大，44KD~92KD。 σ亚基的功能：无σ亚基的酶叫核心酶，核心酶只能使已开始合成的RNA 链延长，而不具备起始合成活性，加入σ亚基后，全酶才具有起始合成 RNA的能