培养基的使用和质量控制.ppt

记录 培养基配制记录 灭菌记录 培养基质量控制记录 准确、及时 谢谢 * * 中国药品生物制品检定所 培养基的使用和质量控制 内容提要 培养基的使用 培养基的质控管理 培养基的使用 培养基的购买和接收 培养基的制备 培养基的储存 培养基的质量控制 培养基购买和接收 培养基的购买 微生物实验室中，工作质量的前提是培养基。 根据既定的目的选用正确的培养基；且符合法规。 选择合格的供应商。 培养基的接收 检查培养基的名称、批号、效期、说明书（化学品安全技术说明书）。 按照厂家说明进行储藏，同时标识接收日期。 培养基储存过程中的温湿度应进行监控。 培养基制备 水 称量 充分溶解 不要过度加热 清洁的玻璃器皿 灭菌条件 标识和记录 培养基制备 水 去离子水或纯化水（新鲜的、不含二氧化碳） 禁止使用自来水 总原则：根据厂家说明书的要求选择合适的水。 培养基制备 成分称量 首次开瓶检查 对开瓶日期进行标识。 检查颜色、性状，当有明显的物理变化时应废弃。 称量 严格按照说明书的要求进行制备，对称量结果进行记录。 一般精确度为±0.1g，分析天平为±0.001g 培养基制备 灭菌条件 培养基在配制后应立即进行灭菌，不允许放置一段时间后灭菌。 按照验证过的装载模式及灭菌条件进行灭菌。 培养基制备 文件和标识 ?SOP —能够指导日常工作，具有可操作性 ?记录—能够反映配制的真实情况 ?标识—灭菌标识和培养基标签 培养基标签： 培养基名称 批号 有效期 培养基名称：营养琼脂 批号：090512 效期：2010.05.11 培养基制备 检查培养基（灭菌后） pH 生长能力 无菌测试 容器/平皿的完整性 固体培养基的再融化不应超过一次。 培养基储存 培养基应根据生产商的说明书，按照验证过的条件进行储存，同时注意琼脂培养基易受冷冻的影响。 ?重复融化应被限制。 ?融化的培养基储存不应超过8小时。 ?培养基应标识有效期，超过有效期不得使用。 应根据当地生物危险品安全程序处置。 培养基质量控制 pH 培养基无菌检查(Sterility Check简称SC) 培养基促生长试验或适用性检查(Growth promotion test简称GPT) 培养基抑制性试验(Inhibition Test简称IT) 培养基特征性试验（ Indicative Test） 阳性对照(Reference Count简称RC): 阴性对照(Negative Control简称NC) 培养基质量控制 pH 符合药典！ 什么时候测试，用什么测试？ 培养基质量控制 培养基无菌检查? 定义：测试培养基经过灭菌后是否杀死培养基里的微生物。 所有灭菌的培养基 培养基类型、检验方法和判定标准： 培养基类型 检验方法 判定标准 稀释液 过滤法 无菌落生长 增菌液 增菌法 培养基无生长 琼脂培养基 （包括计数和分离用） 浇平板法 无菌落生长 培养基质量控制 培养基适用性检查 计数用培养基。 控制菌检查用 培养基质量控制 附录108页，计数培养基的适用性检查 适用性检查 取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌各50～100cfu，分别注入无菌平皿中，立即倾注营养琼脂培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，混匀，凝固，置30～35℃培养48hr，计数；取白色念珠菌、黑曲霉各50～100cfu，分别注入无菌平皿中，立即倾注玫瑰红钠琼脂培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，混匀，凝固，置20～25℃培养72hr，计数；取白色念珠菌50～100cfu，注入无菌平皿中，立即倾注酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基，平行制备2个平皿，混匀，凝固，置20～25℃培养72hr，计数。同时，用对应的对照培养基替代被检培养基进行上述试验。 结果判定 被检培养基的菌落数与对照培养基菌落数相比大于70%，且菌落形态大小应与对照培养基上的菌落一致。判该培养基的适用性检查符合规定。 培养基质量控制 附录110页，增加：控制菌检查用培养基适用性检查 控制菌检查用的培养基应进行培养基的适用性检查，成品培养基、由脱水培养基或按培养基处方配制的培养基均应检查。检查项目包括培养基的促生长、指示和抑制特性能力。 中国药品生物制品检定所 * 控制菌检查 培养基 检查项目 试验菌株 大肠埃希菌 胆盐乳糖培养基 促生长能力 大肠埃希菌 抑制能力 金黄色葡萄球菌 MUG培养基 促生长能力+指示能力 大肠埃希菌 曙红亚甲蓝琼脂或麦康凯琼脂 促生长能力+指示能力 大肠埃希菌 大肠菌群 乳糖胆盐发酵培养基 促生长能力 大肠埃希菌 抑制能力 金黄色葡萄球菌 乳糖发酵培养基 促生长能力+指示能力 大肠埃希菌 曙红亚甲蓝琼脂