仪器校验基础知识PPT.ppt

光谱峰纯度 特异性和专属性 能够在一组信号中选出 相要的信号 例如：接有紫外-可见光检测 器的HPLC 只对一个特别成份响应 例如：接有质谱检测器的? 线性 是样品成比例浓度的分析中获得测试结果 的能力（在给定范围内） 考虑到单点校对 浓度范围至少等于准确度测量的范围（最 少5个点）。 ???? ☆测试：测试浓度的80% 到120% ???? ☆ CU: 测试浓度的70% 到130% （除非其他是 合理的） ???? ☆溶出度：指定范围的+/- 20% ???? ☆杂质: 标准的50到120% 。 性能测试: HPLC模块: ???? ☆泵: 流速准确度，递度准确度 ???? ☆检测器: 线性，噪音，漂移，波长准确度 ???? ☆进样器: 重现性，线性和残留 ???? ☆柱温箱: 温度准确性 ???? ☆硬件和软件功能测试 泵 流速准确度 ???? ☆影响保留时间的重现性 梯度准确度和线性 ???? ☆影响分离度和保留时间 使用脱气甲醇(或1:1的水/甲醇混合物） 测量1.0ml/min和2.0ml/min的流速准确 度 典型认可: 设定流速的± 1.0% 泵梯度准确度 溶剂A: 甲醇 溶剂B: 含有示踪剂的甲醇 ???? ☆例如. 0.1 % 丙酮或咖啡因(272nm) 梯度图 ???? ☆100% A到100% B ???? ☆逐步回到100% A ???? ☆80%B时: B1/H x 100% ≈ 80% ???? ☆20%B时: B4/H x 100% ≈ 20% 典型认可:平均梯级高度的± 1 0% 泵压力测试 用于测试: 阀的功能 连接密闭性 使用甲醇做为流动 相 设定上端压力限度 设定流速为1 mL/min 堵住泵的出口 设定流速为0.1 mL/min 直到压力 HPLC性能检测咖啡因测试 典型的HPLC设置参数: (i) 色谱柱: ODS 1, 5μ (ii) 流动相: 水/乙腈 (iii) 流速: 2.0 mL/分钟 (iv) 进样体积: 10-20 μ L (v) 检测波长: 272 nm (vi) 柱温: 室温 进样器的精密度 精密度 ???? ☆重复进样相同量的样品来测试进样器的性能 ???? ☆与外标标准品定量模式相比较，峰面积或峰 高的精密度和准确度是非常重要的 进样器精密度测试 ???? ☆咖啡因用流动相溶解，重复进样6次 ???? ☆记录峰面积的%RSD 和保留时间 典型认可: 1.0% RSD 进样器的线性 线性 ???? ☆以适当比例不同量的样品测试进样器的性能 进样器线性检测 ???? ☆使用流动相制备标准溶液 ???? ☆进不同体积的样品 ●通常为5到100 μL ???? ☆描绘响应值对进样体积曲线 ???? ☆计算相关系数r 典型认可: r 0.999 紫外-可见光检测器线性(ASTM 方法: E685) 流动池中加入一系 列不同浓度的标准 溶液 浓度范围通常应产 生响应值到2AU 描绘响应值（AU） /浓度对log浓度曲 线 线性范围: ???? ☆浓度应在RC的±5%范围内 进样器残留 残留 ???? ☆清洗进样环和进样后样品的液体通道检测进 样器的性能 ???? ☆影响定量的准确度 进样器残留检测 ???? ☆一个样品进样几次后进一次空白样品（只是 溶剂） ???? ☆定量检测空白样品中分析物的量评估残留 典型认可:样品峰面积的± 1.0% UV-Vis 检测器的性能 波长准确度 ???? ☆影响灵敏度和选择性 ???? ☆影响杂质分析 线性 ???? ☆影响标准品和样品间的峰面积和峰高的准 确度 噪音和漂移 ???? ☆检测限和定量限 ???? ☆影响基线检测和峰积分 UV-Vis 检测器波长准确度 内置滤波器或光谱线Built-in filter or spectral line 重铬酸钾的0.001N高氯酸溶液 氧化钬的0.001N高氯酸溶液 高氯酸铒溶液（2g溶于25ml水中） ????☆λmax 为255 nm 咖啡因溶液 ???? ☆λmax 为205nm, 272 nm和λmin 为244 nm 典型认可: ± 2 nm UV-Vis 检测器线性 流动池中加入一系列不同浓度