‘巨峰’葡萄细胞分裂素氧化酶基因CKX3的克隆与表达分析.pdfVIP

园艺学报，2015 ，42 (7) ：1233 –1240. Acta Horticulturae Sinica doi ：10.16420/j.issn.0513-353x.2014-1106；http ：//www. ahs. ac. cn 1233 ‘巨峰’葡萄细胞分裂素氧化酶基因CKX3 的克 隆与表达分析 1 1 1 2 1 1,* 余义和 ，李秀珍 ，陈迪新 ，李桂荣 ，李学强 ，张国海 1 2 （河南科技大学林学院，河南洛阳 471003 ； 河南科技学院园艺园林学院，河南新乡 453003 ） 摘 要：结合同源克隆和 RACE 技术在‘巨峰’葡萄（Vitis labruscana Bailey × V. vinifera L. ‘Kyoho ’） 中克隆了细胞分裂素氧化酶基因 CKX3，分析了该基因的表达特性及其对细胞分裂素的响应。序列分析表 明，该基因cDNA 全长为 2 049 bp （GenBank 登录号：KP689597 ），ORF （开放阅读框）为1 569 bp，编 码 522 个氨基酸，具有 FAD （黄素腺嘌呤二核苷酸）结合结构域和细胞分裂素结合结构域。该基因定位 在葡萄的 7 号染色体上，具有 4 个内含子，5 个外显子。氨基酸序列多重比对和系统进化树分析显示‘巨 峰’葡萄 CKX3 与荷花 NuCKX3 亲缘关系最近，与毛果杨同源性较高。基因表达分析结果显示‘巨峰’ 葡萄 CKX3 主要在根部和花序中大量表达，其次是在卷须和果实中有较高的表达，在茎和叶中的表达量较 低；在花序发育过程中，在盛花期前表达量较低，盛花期以及盛花后表达量增加。在 6-BA 处理葡萄叶片 后，CKX3 的表达与细胞分裂素氧化酶的活性都高于对照。 关键词：葡萄；细胞分裂素氧化酶；CKX3；表达分析 中图分类号：S 663.1 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2015 ）07-1233-08 Isolation and Expression Analysis of Cytokinin Oxidase Gene CKX3 in Kyoho Grapevine 1 1 1 2 1 1,* YU Yi-he ，LI Xiu-zhen ，CHEN Di-xin ，LI Gui-rong ，LI Xue-qiang ，and ZHANG Guo-hai 1 2 （College of Forestry，Henan University of Science Technology ，Luoyang ，Henan 471003 ，China；School of Horticulture Landscape Architecture ，Henan Instiute of Science and Technilogy ，Xinxiang ，Henan 453003 ，China） Abstract ：Combined with the homologous clone and RACE technology to clone the cytokinin oxidase gene CKX3 in Kyoho grapevine ，and analyzes the characteristics of the gene expression and its response to cytokinin. Sequence analysis i