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2.第九章实验误差及其控制
实验误差及其控制;一. 误差公理与误差的表达
1. 误差公理
误差——测定值与真实值之差
实验结果都会有误差,误差自始至终存在于一切科学实验过程(人们认识能力与科学技术水平的限制,测量方法与工具的有限性,抽样误差不可避免性等)。;2. 误差的分类
产生原因与性质分为:随机误差、系统误差、 过失误差。
误差的来源: 自然误差、人为误差。
误差的可控性:可避免的误差(易控制)、不可避免的误差(不易控制)。;3. 误差的表达
① 精密度(重复性)
同一方法重复测定同一样品,测定值的一致程度。
衡量指标:标准差(S)、变异系数(CV)
CV(%)=(S/X)×100%
例:重复测定某样品(n=10), x=7.120, s=0.155
CV=2.18%;例:高效液相色谱测定阿米替林;② 准确度(测定值与真实值的接近程度)
偏差系数(CB)
CB(%)=100%-R(%)
R(%)=[(VP -VB)/VA ]×100%
R=回收率
VA=加入标准量;VB =未加标准量前的测定值
VP=加入标准量后的测定值;回收量= VP- VB
如:5次测定血清某物质的均值为15mg/L,加入该物质标准量10mg/L,则得均值为24.5mg/L,计算回收率:R(%)=[(24.5-15)/10]×100%=95%
范围:100±1-10%;偏 倚;④ 精确度(精密度与准确度的综合指标)
分析系数(CA)
CA(%)=100%- (CV)2+(CB)2; 二. 随 机 误 差
特点:双向性,分布随机性,不可避免性和可减性
原因:1.抽样误差
2.非均匀误差(受试对象性别、年龄、生活习 惯、工作条件、居住环境。)
3.分配误差(受试对象组间分配)
4.分野误差(细胞计数)
5.偶然误差(黑子爆炸,影响电生理)
;减少随机误差的主要方法:
随机化和对照原则;2. 分层抽样;3. 交叉实验;
4. 盲法;5. 调整样本的大小和适当增加重复数
Sx= s/ n ,增大样本数,减少标准误
增加重复数,平行管,三管测定,减少标准误; 三. 系统误差
特点:单向性,恒差和/或恒比,可消性。
表现形式:
1. 恒定系统误差(偏向真实值的一侧)
仪器末校正,样品处理
2. 线性系统误差(测定时间与空间顺序)
生物物质效应,药物作用,酶催反应(测定值与时间有关)
肌肉疲劳实验:开始收缩幅度大,密集;一段时间后,收缩 幅度小,间歇加大。
3. 非线性系统误差
测定时间延续而呈曲线变化或周期性变化
糖皮质激素分泌:上午8-10点分泌高峰,午夜12点最低。
月经周期-雌激素变化;系统误差的原因:
①仪器误差(仪器损耗,未校正)
②方法差异(采用方法不同,如微量蛋白质测定有化学 分析法,放免法与ELISA法;样品处理方法不同(浓度,PH,温度,作用时间等)
③试剂差异
6级:保证试剂(GR,必需时用);分析试剂(AR,科研用);化学纯(CP);实验室试剂(LR,中学生用);生物试剂(BR);工业试剂(浓硫酸,重铬酸盐)。;④ 条件差异
受试对象环境条件:动物(气候,季节,温度,湿度 通风,照明,营养状况)
病人(湿度,温度,通风,照明,饮食,服务态度)
实验室环境条件:季节变化,湿度
⑤ 顺序差异
a.个体生物钟现象(昼夜,季节,近海地区潮汐的涨落变化)
睡眠与觉醒,体温,血压,心率,血浆中激素水平等
BP,HR:上午9:00-10:00最高,凌晨3:00最低
犬冠脉左旋支的血流量:16:00比上午8:00高12.8%;血小板聚集性: 上午6-9时,聚集性显著增强
心肌梗死和心源性猝死:早晨醒后死亡率明显增加,
9:00- 10:00高峰
皮内注射致敏原后局部发红的范围:午夜反应最强,
中午11时最轻
吲哚美辛口服后浓度: 早晨7时>
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