细胞表面的完全解放.PDF

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细胞表面的完全解放

細胞表面的完全解放 細胞分選新選擇REAlease™ Technology REAlease Biotin Complex的重組抗體片段允許批次間一致性與高再現性結果 目標細胞不帶MicroBeads - 適合進行第二次細胞標記與分選 目標細胞不帶有標記 – epitope可再次被利用,細胞適用於任何下游實驗 REAlease MicroBeads的開發是為了在磁性分選後,獲得不帶有任何標記的目標細胞 只需要簡單的二個步驟,就能夠移除MicroBeads與抗體的標記。其原理是透過REAlease Biotin Complex (重組抗體片段複合 物)與Anti-Biotin MicroBeads以高親合力結合至目標細胞進行磁性分選,分選後利用REAlease Bead Release Reagent 移除 MicroBeads ,並接著以REAlease Release Reagent促使REAlease Biotin Complex的自發性解離與抗體片段單體化,降低親合 力,進而移除目標細胞上的標記物。 REAlease MicroBeads的細胞分選步驟 1 間接的細胞標記方式 目標細胞 + REAlease Biotin Complex + Anti-Biotin MicroBeads 1 2 磁性分選 帶有MicroBeads的目標細胞停留在管柱內 2 3 洗脫目標細胞 利用REAlease Bead Release Reagent將細胞 洗脫出,同時移除MicroBeads 3 選擇不同的MicroBeads進行第二次細胞標記: 4.1 若使用REAlease MicroBeads進行第二次細胞標記 須先移除抗體標記 用REAlease Release Reagent移除REAlease Biotin Complex REAlease Release Reagent可促進REAlease Biotin Complex的自發性解離,而使抗體片段 單體化並脫落,最後可獲得不帶有任何標記的 目標細胞。 4.2 若使用MACS MicroBeads進行第二次細胞標記 不須移除抗體標記 直接使用MACS MicroBeads標記 4.1 4.2 Target cell with antigen Non-target cells REAlease Biotin Complex REAlease Biotin Complex (recognizing different epitopes) Anti- Biotin MicroBead MACS® MicroBead REAlease Bead Release Reagent 分選結果 - 高純度的細胞 A 分選前 10³ B 分選後,細胞純度 10³ 10² 為98.4% ±1.38% 10² C

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