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PRMT2在甲状腺癌组织中的表达及其调控CCND1的机制研究研究生姚姣导师文芳 教授曹仁贤 教授中 文 摘 要目的：研究甲状腺癌组织中 PRMT2 的表达情况，并观测高表达 PRMT2 对甲状 腺癌 TPC-1 细胞 CCND1 基因以及 PI3K-Akt 信号通路的影响；探讨 PRMT2 调 控 CCND1 的分子机制。方 法：用免疫组化的方法检测 PRMT2 在甲状腺癌组织芯片上的表达，并对 PRMT2 与甲状腺癌组织的临床参数相关性进行分析。将不同浓度真核表达载体 pcDNA3.2/V5-PRMT2 及空载体 pcDNA3.2/V5 导入 TPC-1 细胞，采用 Western blot 检测 PRMT2 对于 CCND1 基因以及 PI3K-Akt 信号通路的影响；加用 Akt 抑制剂（LY294002 及 Wortmannin）处理，最后再采用 Western blot 检测 PRMT2 对于CCND1 基因以及 PI3K-Akt 信号通路的影响；结 果：1）组织芯片结果显示：甲状腺癌组织中PRMT2的表达明显高于正常甲 状腺组织，有统计学意义(P0.05)；在甲状腺癌组织中PRMT2的核表达缺失率为 75.7%，明显高于正常甲状腺组织核表达缺失率30%，两者比较有统计学意义(P﹤0.05)；PRMT2的异常表达与年龄有相关性，PRMT2在年龄﹥50岁的患者甲状r 腺组织中表达高于年龄≤50岁的患者甲状腺组织，有统计学意义(P0.05)；PRMT2 的表达与患者的性别、有无淋巴结转移、肿瘤大小以及病理分型无关(P﹥0.05)。2）PRMT2 高表达可下调 CCND1 基因的表达， 抑制 PI3K-Akt 信号通路；3）加入 Akt 抑制剂（LY294002 及 Wortmannin）处理后的 CCND1 基因以及 PI3K-Akt 信号通路相关基因表达均下降。结 论：1）甲状腺癌组织中PRMT2主要在胞浆高表达，而核表达缺失，PRMT2 的异常表达与患者年龄有关。2）甲状腺癌 TPC-1 细胞中 PRMT2 通过抑制 Akt/GSK-3β 信号通路调控5CCND1 的表达。【关键词】PRMT2 ；TPC-1；CCND1；PI3K-AktThe expression of PRMT2 in thyriod cancer and its6mechanisms controlling CCND1 expression in TPC-1 cellsAbstractObjective: To test the expression level of PRMT2 in thyroid cancer and normal tissue ,investigate the impact of exogenous of PRMT2 on the expressing of CCND1and PI3K in human thyroid cancer cell line TPC-1；and to test the molecularmechanism of PRMT2 regulating the expression of CCND1.Methods:Tissue microarray was carried out to analyze the correlation between PRMT2 expression and clinical parameters in thyroid cancer.Human thyroid cancer cell line, TPC-1 cells were transfected with expression plasmid pcDNA3.2/V5-PRMT2 (different concentration), and pc DNA3.2/V5 (empty plasmid as control) by using Lipofectamine 2000 .Western blot were applied,to test the impactof exogenous of PRMT2 on the expressing of CCND1 and PI3K in TPC-1 cells；Andthen, pretreated cells with Akt inhibitors(LY294002 or Wortmannin) respectively,western blot to test the impact of exogenous of PRMT2 on the expressing of CCND1 and PI3K in human thyroid cance