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TLR 信号通路在干眼症中作用机制的研究硕士研究生：邹婕妤导师：刘二华教授中文摘要目的：检测TLR4（toll-likereceptor4）的角膜表达，研究TLR信号通路在干眼症（dryeyedisease DED）免疫发病机制中的作用。方法：采用7-8 周大的雌性C57BL/6 小鼠21只，随机分为3 组：正常组、TLR4 抑制组和干眼组。采用免疫组织化学染色技术和逆转录PCR检测正常组和干眼组小鼠角膜上皮中TLR4 的表达水平。用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测干眼组和TLR4抑制组小鼠角膜上皮中炎性细胞因子（IL-1β、IL-6、TNF）的表达水平。用角膜荧光染色(CFS)检测干眼症的严重程度。结果：（1）正常角膜上皮细胞内表达TLR4。（2）DED显著的增加了细胞表面TLR4 的表达。（3）TLR4抑制减轻了CFS的严重程度，并极大减少了IL-1β、IL-6、和TNF的表达。结论:TLR4 参与了DED的炎症反应，DED增加了TLR4 的角膜表达。关键词：Toll 样受体4；干眼症；免疫发病机制。2Theresearch onTLR signaling pathwayson pathogenesis of dry eyediseaseAbstractObjective:Toinvestigatethecornealexpressionoftoll-likereceptor(TLR)4and determineits contribution to the immunopathogenesis of dryeyedisease (DED). Methods: 7 to 8-week-old female C57BL/6 mice were housed in a controlledenvironmentchamber.Randomlydividedinto3groups:normalgroup,TLR4 inhibitiongroupandDEDgroup.TheexpressionofTLR4bythecornealepithelium wasevaluatedusingreversetranscriptionPCRandImmunohistochemical staining.The expressionofproinflammatorycytokines (IL-1β,IL-6,TNF)bythe cornealepithelium wasevaluated usingELISA. Corneal fluoresceinstaining(CFS) was performed to evaluate clinical diseaseseverity.Result:(1)TheepithelialcellsofnormalcorneasexpressedTLR4intracellularly. (2)DED significantlyincreased the cell surface expression ofTLR4.(3)TLR4inhibitiondecreasedtheseverityofCFSandsignificantlyreducedthemRNA expression ofIL-1β,IL-6, and TNF.Conclusion:TheseresultssuggestthatDEDincreasesthecornealexpressionof TLR4 and thatTLR4 participates in theinflammatoryresponse toDEDKeywords: TLR4; Dryeyedisease; immunopathogenesisPostgraduate: Jie-YuZouDirected by: Professor Er-Hua Liu3前言干眼症(dryeyedisease DED)，又称干燥性角膜结膜炎，是指任何原因引起的泪液质和量异常或动力学异常导致的泪膜稳定性下降，并伴有眼部不适，导致眼表组织病变为特征的多种疾病的总称，是眼科中发病率最高的眼表疾病之一，其临床表现多种多样，常见的症状有异物感、干涩感、烧灼感、畏光、视物模糊和视疲劳。轻度的干眼症不影响或轻度影响视力，晚期可以出现角膜变薄、溃疡甚至穿孔，如果形成角膜瘢痕将严重影响视力。[1]因干眼症在早期没有明显的临床症状，未能引起患者的重视，导致许多患者直到发生不同程度视力损害，才到医院就诊，延误了治疗时机，严重影响了患者的生活质量，应当引起我们的重视。目前干眼的发病机制尚不明确，尚缺乏对其预防及根治的方法。对干眼的发病机制、分类方法以及治疗手段仍是眼科研究热点。目前许多学者对干眼的发病机制