家畜繁殖学6.人工受精幻灯片.ppt

各种当前使用的一次性输精器 各种牛用输精器实物外观图 二 、输精要求 Requirements 三、输精方法 Methods （一）母牛和母水牛的输精方法 1、开膣器输精法：目前已经不用 2、直肠把握子宫颈输精法 于直肠内隔直肠壁握住子宫颈外端，另一只手持 输精导管插入阴门避开尿道口，插入子宫颈口进行子 宫输精。 优点： （1）用具简单，操作安全，不易感染； （2）母牛无痛感； （3）输精部位深，受胎率较高； （4）可防止误给孕牛输精而引起流产。 牛和水牛的输精方法和要求： （1）方法：直肠把握法 （2）输精剂量：冷冻精液0.2-1ml （3）输入有效精子数：0.1-0.12亿 （4）输精时间：发情开始后10-12h，或排卵前10-20h （5）输精次数：间隔8～10h两次 （6）输精部位：子宫内 正确的牛直肠把握输精图 直肠检查 直肠把握子宫颈输精 * * 三、稀释液的种类和配置 （一）稀释液的种类 1、现用稀释液 奶类和等渗糖类为主。 2、常温保存稀释液 用于常温保存精液，pH较低。 3、低温保存稀释液 用于低温保存精液，含有卵黄和奶类等抗冷休克物质。 4、冷冻保存稀释液 用于冷冻保存精液，含抗冻物质如甘油、DMSO 。 （二）稀释液的配制 1、各种成分的准备 （1）蒸馏水：现制、灭菌。 （2）化学药品：成分要纯净，溶解过滤后消毒，高温变性药品应用细菌滤膜过滤。 （3）奶类：新鲜，不含其它物质。于（90~95℃）水浴10min，去除奶皮。 （4）卵黄：取自新鲜鸡蛋，用前对蛋壳消毒。 （5）抗生素、酶类、激素、维生素等：于稀释液消毒冷却后加入。 2、配制稀释液注意事项（书P155） （1）所用物品认真清、消毒、干燥； （2）如配制液状稀释液，最好现用现配，不要长时间保存（预混除外）。 四、精液稀释方法与稀释倍数 （一）精液稀释方法 1、新采集的精液于30℃稀释，防止精子冷休克； 2、采精后及时检查、稀释，时间长后精子容易死亡； 3、稀释液与精液温度应该一致； 4、稀释时，将稀释液沿容器壁缓慢倒入精液，高倍稀释时分次进行； 5、稀释后立即镜检活力，以确保操作正确。 （二）稀释倍数 稀释倍数 = 稀释液的量/精液量 如何精确计算一份精液的稀释倍数？ 首先要考虑以下几个因素： 猪 1、该份精液总量 250ml 2、精子密度 2亿/ml 3、有效精子数（保存后使用前精子活率） 0.6 4、每次输入有效精子数 10亿 5、每次输精量 20ml 该份精液的有效精子数： 250ml×2×0.6=300亿 则分成的份数： 300亿/10亿=30份 则稀释后总量： 30×20=600ml 则稀释倍数： 600-250/250=1.4 现行的精液保存方式有三种： 常温保存（15-25 ℃） 低温保存（0-5 ℃） 冷冻保存（-79 ℃或-196 ℃）  第五节 精液的保存Section 5 Semen Storage 液态保存 固态保存 一、常温保存（15-25 ℃），变温保存 1、原理：是利用一定范围的酸性环境， 抑制精子的活动，使精子保持可逆的静止状态而不丧 失受精能力。 2、稀释液： （1）能量物：如葡萄糖 ； （2）缓冲体系：如柠檬酸钠、碳酸氢钠 ； （3）抗生素：如青、链霉素等。 3、方法：隔水降温。 天热时，尽可能降低保存温度如放入水井、水缸， 天冷时，放在有暖气的室内。 适合猪精液保存（15～17℃） 二、低温保存（0-5 ℃） 1、原理：利用较低的温度来减弱精子的活动和代谢，从而延长精子的生命。 2、低温保存稀释液： 除室温保存液应具有的成分外（不充CO2），在牛用的稀释液还需用加卵黄或牛奶。 为何要添加？ 3、保存前的处理 （1）稀释分装：低温保存的精液通常用玻璃或塑料瓶分装，瓶内尽量不留空气，然后封口; （2）降温处理：通常按0.2℃