黑茶茯砖茶“金花”菌生长条件研究.doc

黑茶茯砖茶“金花”菌生长条件研究 　　 　　摘要获砖茶“金花”菌谢瓦氏曲霉间型变种生长的pH值范围在pH3- 　　pH6,最适生长为pH5:最高生长温度为38 C，最适生长温度为30 C，子囊抱 　　子和分生抱子两种单抱子萌发率接近，前者为17厂，后者为18.5厂，两种单抱 　　菌落特征一致，长势一致，均能产子囊抱子和分生抱子。抱子的有性型和无性 　　型在特定条件下可以互相转化。该菌为同宗结合。 　　关键词获砖茶;谢瓦氏曲霉间型变种;分生抱子;子囊抱子;同宗结合 　　获砖茶为边茶之一，从1860年诞生一个多世纪以来，人们一直将该茶砖上产生“金 　　花”的多少作为鉴别质量的重要指标，不少人对产“金花”的微生物(俗名“金花”菌) 　　进行过鉴定经究，且.鉴定结果各异，作者经过研究将其鉴定为谢瓦氏曲霉间型变种 　　( Asaergillus chevalierivar intermedius ) } I }，但人们对该菌的生长发育条件研究不 　　多。作者的这一研究为该菌在实践中人工接种生产获砖茶，避免自然接种造成污染提供 　　一定的理论依据。 　　一、材料和方法 　　1菌株来源，分离和保藏获砖茶为贵州桐梓茶厂生产。直接用无菌拨针挑取获 　　砖茶块上的黄色闭囊壳并接种于PDA琼脂平板培养基上，30℃培养长出菌落，再挑取 　　单个纯菌落菌丝接种于PDA斜面上培养，长成菌落后于室温下保藏。 　　培养基 　　M3Y.蔗糖30g，麦芽浸膏20g(可用20g干麦芽浸出2008浸汁代替)，酵母膏 　　5 g,琼脂20g，水1000m1o 　　M20Y:加2008蔗糖，其他成分同M3Y。即含20拓的蔗糖。 　　M4oY:加400g蔗糖，其他成分同M3Y，即含40粥的蔗糖。 　　CZ:查氏培养基fz}0 　　CZ20. 20厂蔗糖查氏培养基 　　MM:麦芽汁培养基 　　3试验方法 　　(I)接不，}1石3) 　　(,})pH泣及袍子萌发生}之最言温测定; 　　I-i i C Z C7。创{剐音序笼，以NH通西0:i1氮源，分别调整PTI为2，:i，A，5，G， 　　7，S和。，接种后于30 C二哈养。-r_ 　　}ti}1和i;-I 3 0 }`两种斜而培养共，按种抱子后分别放于::; 0.} C和}} } C培养n 　　天，4l:后进行变温处理 　　}JO单袍子萌发生长及两种袍子在不同温度不同培养墓上的菌落生长测定 　　用单抱子分离技术[4)，分离单个子:} } t7子和分生抱子，将两种不同的单个袍子分别 　　接种在培养皿中培养5夭，统计萌发形成的菌落个数，标出两种抱子荫发百分率，并比 　　较两种菌落特征。 　　用4种培养-, r.分别接种子囊抱子和分生袍子，于3 r `C，30 C及05℃下培养8天。 　　(4)观察记载 　　,_CF日测一次菌落直径，对菌落颜色，长势，产色素，菌落表面特征及产袍等情况均 　　作详细描述和记录 　　一、结果 　　}H值对抱子萌发生长的影响 　　表1 pH值对生长的影响 　　菌落直径(mm) 　　菌落,i寺于)F 　　黄色黄色黄色黄色 　　注’培养基为CZG 　　从表1可见，该菌生一i之的pH值范围是3一6之间。pH 4-pII 6生长较好。 　　gH z以上和pH2以下均不萌发生长。 　　2.温度抱子对萌发生长的影响 　　从表2可见，该菌抱子萌发温度和生长的最高温为38 C，超过38 C抱子不萌发，且 　　萌发的菌丝死亡。 　　3.单抱子萌发生长情况及两种抱子在不同温度和不同培养基上菌落生长比较 　　(1)单抱子萌发生长情况 　　萌发率(形) 　　17.0 　　两者之菌落，外观一致，长势一致， 　　均能产分生泡子和子囊抱子 　　注:培养基:M20Y 　　表3可见，子囊抱子和分生抱子的单抱子在M20Y培养基上35℃均能萌发生长， 　　两种抱子的单抱萌发率较一致。子囊抱子的萌发率为17拓，分生抱子的为18.500两种 　　单抱菌落外观一致，均能产生分生抱子和子囊抱子。 　　(2)两种抱子在不同培养基上生长情况 　　图1可见，4种培养基上，30℃下两种抱子产生的菌落大小相似。生一氏速度一致。 　　(3)两种抱子在不同温度下的生长情况 　　图2可见，两种抱子在相同培养基，不同温度下菌落生长速度，菌落大小无明显差 　　异。从图1和图2说明两种抱子对相同环境条件反应较一致。 　　三、讨论 　　“金花”菌—谢瓦氏曲霉间型变种的生长条件研究给获砖茶工艺改进提供一定的 　　理论依据。 　　该菌在获砖茶上大量着生，对茶叶的内质和外观都有很大作用，它形成的“金花” 　　是重要的外观鉴评标准，也是贸易成交的首要条件，传统获砖茶制作工艺中“金花”形 　　成(黄色闭囊壳堆的形成)的最关键步骤是堆握和发花。堆握是黑茶初制巾最重要的特 　　有工序