ELISA及相关免疫分析技术PPT.pptVIP

JSCCL XUBIN 加样 加样应用微量移液器（加样枪)按规定的量加入微孔板的1/3处避免加在孔壁上部，并注意不可溅出，不可产生气泡。 每次加样应更换吸嘴，做到一人一吸头，以免发生交叉污染;干吸头预先在血清中抽吸三次。 样本稀释，目的是为了减少非特异性反应，所以一定要先加稀释液后加样本，特别注意加样后要在微量振荡器上振荡30秒钟，同时注意防止液体溢出。如后面操作步骤中加二种以上试剂时均需振荡混匀。 如用滴瓶滴加试剂应先将滴瓶摇匀并挤去第一滴有气泡的试剂后加样。 温育 抗原抗体反应需要在一定温度下（37°C），经过一定的时间才能达到反应的平衡点 ELISA边缘效应是由温育形成的。所以温育一般采用能使反应液温度迅速达到平衡的水浴法。一种放在水浴箱的隔板上，另一种是放在温箱的湿盒里。水要浸至板条的1/3处，不可将板条叠加放置。 边缘效应（2ng/mlHBsAg一步法三种不同温育法的结果） 水浴法 孵箱法 微波法 A中央（S） 0.307（0.023） 0.282（0.028） 0.151（0.059） A周围（S） 0.290（0.038） 0.357（0.047）