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实验6 血清ALT预防课件
血清丙氨酸氨基转移酶 （ALT）测定 ALT广泛存在于一般组织细胞中,肝细胞中此酶含量最多。肝炎、中毒性肝细胞坏死等肝病时，血清中此酶活性增加，其他疾病如心肌梗塞、心肌炎等亦有增高。故血清谷丙转氨酶活性得测定在临床诊断上具有重要意义。 * * 目的要求 掌握ALT活性测定的基本原理; 掌握比色法的原理和分光光度计的使用方法; 了解ALT活性测定的临床意义。 ?????比色分析法是通过比较溶液 颜色深浅来测定物质浓度的方法。 ? 比色法的基本原理 比色法的基本原理 当一束单色光通过有色溶液时，由于溶液吸收了一部分光线，透过光的强度就减弱。 透光率：T= I/ Io 吸光度(A) : A=-lgT=-lg (I/ Io) 溶液的透光率越大，说明对光的吸收越少；反之，透光率越小，说明对光的吸收越多;T值越小，A值越大。 朗伯-比尔定律: A=KLC 即吸光度A与溶液的浓度C和溶液的厚度L的乘积成正比关系 。 在其他条件相同时，溶液的浓度越大或是厚度越大，则溶液对光的吸收越强（光密度越大），而透光度则越小。 比色法的基本原理 当一束单色光通过同一有色溶液的两种不同浓度的溶液时，可得出下列两式： ???? 标准管：A标=KC标L?????? 测定管：A测＝KC测L?? 则 比色法的基本原理 C测=A测/A标 ×C标 谷丙转氨酶 ALT 实验原理 α- 酮戊二酸二硝基苯腙(干扰) 取试管4支，按下表加入试剂： 静置10分钟，在520nm 下读取各管吸光度。 实验操作 活力单位：1ml 血清于37℃ 条件下与底物作 用30min产生2.5μg丙酮酸为一个1ALT单位。 计算 A测- A测空 C测(ug/ml )= A标- A标空 × C标(100ug/ml) 1ml血清产生的丙酮酸ug数(C测) 2.5ug ALT活力单位/ml= 生理意义 正常值：2-40单位/ml。 分光光度计的结构和使用 分光光度计的基本原理：利用比色法的原理，采用棱镜或光栅等分光器从含有各种波长的混合光中获得纯度较高的单色光来测量未知溶液的浓度的仪器称为分光光度计。 分光光度计的结构和使用 722型分光光度计原理图和仪器图 722型分光光度计 722型分光光度计 722型分光光度计 * *
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