第四章海洋多糖教学教材.pptVIP

多糖的生物活性 抗肿瘤活性：香菇多糖、黄芪多糖、芦荟多糖、紫草多糖、人参多糖、南瓜多糖 增强免疫作用：香菇多糖、银耳多糖、黑木耳多糖、茶多糖 降血糖、血脂：茶多糖、香菇多糖、黑木耳多糖 抗辐射、氧化：螺旋藻水溶性多糖、银耳孢子多糖、枸杞多糖、螺旋藻多糖、褐藻多糖、海藻硫酸多糖、猴头菌丝多糖、红藻多糖、南沙参多糖 多 糖 概述 理化性质 提取与分离 结构鉴定 海洋中的多糖 多糖的理化性质 1. 无还原性和变旋现象；也无甜味。 2. 多糖通常为无定型粉末，一般具有很强的吸湿性。 3. 多糖一般不溶于有机溶剂，尤其是低极性的有机溶剂。 4. 多糖一般微溶于冷水，易溶于热水中或稀碱水溶液中。 5. 多糖有一定的酸性，尤其是有糖酸构成的多糖酸性较强。 多 糖 概述 理化性质 提取与分离 结构鉴定 海洋中的多糖 多糖的提取 热水提取法：破坏最小 甘薯去皮 → 切成小块(0.3×0.3×0.3cm3) → 每组15g (4组共60g) 于搅拌器中 → 加蒸馏水240 mL → 捣碎1min → 分成4份 → 3层纱布过滤 → 滤液置50℃恒温水浴30min → 倾去上层液体 → 25 mL蒸馏水重新悬浮白色沉淀，室温下静置15min（两次） → 60℃烘干4h → 称重 用沸水提取2-6小时。提取液如粘度不大，则可采用过滤法过滤去残渣，对于粘度大的提取液则必须采用离心法去残渣，即得到多糖提取液或上清液。 例如：大麦中活性多糖提取、大枣多糖提取、老头草中多糖的含量测定、乌龙茶多糖提取等。 提 取 淀 粉 稀碱水溶液提取法： 酸性多糖或分子量较大的多糖在热水中溶解度不大，所以常用5-15% NaOH或Na2CO3水溶液提取 **注意：用稀碱溶液提取时，温度必须保持在10℃以下，否则多糖容易发生降解反应。通常在冷却的条件下(4℃)，放置6-8小时，然后过滤或离心，滤液用稀盐酸调节pH至中性即得碱性多糖提取液。 或用稀酸水溶液提取 稀酸、稀碱提取液应迅速中和或迅速透析，浓缩与醇析而获得多糖沉淀 酶解法： 在比较温和的条件中分解植物组织，加速多糖的释放或提取 粉碎的植物悬浮于水中, 调节至最适温度（通常是38-50℃）, 最适pH范围（通常是pH3.8-4.5）, 加入5-25%复合酶，反应4小时, 过滤去残渣, 滤液即为多糖提取液 其它方法： 超声波提取主要是利用超声波空化产生的极大压力造成被破碎物细胞壁及整个生物体破裂，而且整个破裂过程在瞬间完成；同时超声波产生的振动作用加强了胞内物质的释放、扩散及溶解，加速植物中的有效成分进入溶剂，使其进一步增大了有效成分的溶出。 微波提取靠微波电子管发出的电磁波，感应生电，又转化成分子的动能而发热，具有快速、高效、安全的特点；其次微波的频率很高，能透入物体的深度较深，对细胞的结构有较大作用。 多糖的纯化 多糖提取液:含有许多杂质，主要是无机盐、单糖、寡糖、低分子量的非极性物质及高分子量的有机杂质（如蛋白质、木质素） 除杂质 分离 去除无机盐和小分子物质 除蛋白质 脱色 多糖的纯化 使用透析袋除去 无机盐、单糖、 寡糖和低分子量 的非极性物质 蛋白质除去通常采用方法： 1. 酶法：蛋白酶将提取液中的蛋白质酶解。常用链霉蛋白酶(pronase)，其方法是在pH7-8时，加入链霉蛋白酶，37℃消化2-4天，然后反应物于沸水中加热5分钟以阻断反应。 2. Sevage法：蛋白质在氯仿等有机溶剂中变性 将氯仿按多糖水溶液1/5体积加入——加入氯仿体积1/5的正丁醇——剧烈振摇20分钟——离心，分去水层与溶剂层交界处的变性蛋白 特点：条件温和，缺点是效率不高，一般要重复5次左右 3. 三氟三氯乙烷法：等体积的三氟三氯乙烷加入到提取液中，在冷却的情况下搅拌10分钟，蛋白质成胶冻状，离心除去胶状蛋白质。上层水相再用上述溶剂处理2次，即得无蛋白质的多糖 特点：此法效率较高，但因溶剂沸点较低(b.p.56℃)，易挥发，且必须在低温条件下进行，不宜大量应用。 4. 三氯醋酸法：在冰浴中搅拌的情况下缓缓于提取液中加入15-30% 三氯醋酸，直至溶液不再继续混浊。在低温下（4℃）放置4小时。离心除去沉淀即得无蛋白质的多糖提取液 特点：由于三氯醋酸的酸性较强，往往会引起某些多糖的降解，所以操作必须在低温下进行，该法效率较高，常用于植物多糖的去蛋白 多糖的脱色 活性炭脱色法—活性炭对多糖有较强的吸附作用，多糖损失很大，一般不用 弱碱性离子交换树脂—去除多糖粗品中游离的色素。 对酸性多糖的吸附力强，故不宜使用。 多糖提取液，常有较深的色泽（一般