[医药]实验动物遗传质量控制.ppt

检测前，制作测量用的标准直角坐标底板， 在近交系核心群中随机取60日龄以上的成年雄鼠，每次取样10只为1组，制备下颌骨标本后， 在显微镜下，放大10倍测量在直角坐标底板上下颌骨11个形态特征参考点的距离 下颌骨形态学分析 将所测量值的平均数作统计分析，利用判别函数确定下颌骨形态。如果测量值集中，则表明在被测小鼠间无显著的遗传差异。 下颌骨形态分析是一种灵敏、经济、简便、可同时检验大量的遗传位点的遗传监测方法。 若配以扫描机将下颌骨形态扫入电脑，经电脑测量其形态特征参考点的距离，并由电脑完成统计分析，既可减少人为误差，还可加快统计分析的速度。 下颌骨形态学分析 小鼠毛色主要受A、B、C三个等位基因控制，它们分别在不同的染色体上。 cc基因是其他毛色基因的上位基因。白化小鼠cc等位基因是已知的，A，B是待测基因。毛色基因交配测试可把隐性的毛色基因显示出来。 毛色基因交配测试 A-B-C：为野生色 A-bbc：为桂皮色 aaB-C：为黑色 aabbC：为棕色 毛色基因交配测试 根据遗传学原理，被测个体与已知复隐性基因个体交配，可以从F1的毛色判断待测小鼠基因型； 如待测小鼠A、B位点是纯合的，则杂交F1的毛色只出现一种颜色。 毛色基因交配测试 通常将60-70日龄待测小鼠雌鼠与已知毛色基因结构的DBA/2（aabbCC）雄鼠交配，根据杂交F1的毛色确定待测小鼠主要毛色基因型，鉴定是否纯合。 毛色基因交配测试 1、基因库大，杂合率高 封闭群是一种长期与外界隔离，雌雄个体间能够随即交配的动物群，其遗传组成比较接近自然状态下的动物群体结构，具有类似于人类群体遗传异质性的遗传组成。其基因的杂合率较高，个体间的基因型不一致，因此，群体基因库较近交系大。 封闭群动物的遗传学特性 2、群体基因频率基本保持稳定 封闭群动物不从其外部引入新基因，又坚持随机交配从而使群体在一定范围内保持相对稳定的遗传特征。群体基因频率可达到哈迪—温伯格平衡， 封闭群动物的遗传学特性 1908年提出，数学家哈迪（G.H. Hardy）和医生温伯格(W. Weinberg)分别提出关于基因频率稳定性的见解。在一个有性生殖的自然种群中，在符合以下5个条件的情况下，各等位基因的频率和等位基因的基因型频率在一代一代的遗传中是稳定不变的：种群大；种群中个体间的交配是随机的；没有突变发生；没有新基因加入；没有自然选择。 哈迪—温伯格平衡 3、封闭群内的个体差异主要取决于其祖代起源 若封闭群祖代起源于同一个近交系动物，其遗传差异较小。而起源于非近交系的一般封闭群动物，其个体差异较大，且可携带隐性的有害基因，或致死基因，易于诱发突变。 封闭群动物的遗传学特性 鉴于封闭群动物具备上述特性，在遗传学研究中，常作为选择实验的基础群体，供作某性状遗传力的研究。 封闭群动物的应用 封闭群动物的遗传组成具有很高的杂合性 其繁殖力和生活力较强 表现为平均胎产仔数多，胎间隔短，仔鼠离乳率高，生长快，成熟早，抗病力强，寿命长； 生产成本低，可大量供应 广泛用于各种预试验、学生教学和常规的药物筛选和毒性试验中。 回交： 一种实验动物与另一种不同遗传特性的近交系交配获得N1，N1带有1/2近交系的基因组成；N1再与该近交系交配得到N2，N2带有3/4近交系的基因组成。 重组近交系和重组同类系 Recombinant inbred strain Recombinant congenic strain 重组近交系和重组同类系 Recombinant inbred strain Recombinant congenic strain 如果就这样与近交系进行n次回交，按1-（1/2）n 的概率替换近交系的基因；经7-8次回交，将能得到大体上同近交系具有相同基因组成的新品系。 重组近交系和重组同类系 Recombinant inbred strain Recombinant congenic strain 杂交 就是将不同的群体或品系动物进行交配。 假设近交系A的基因型为A1/A1，B1/B1，C1/C1……；近交系B的基因型为A2/A2，B2/B2，C2/C2 ……。两种品系内的血缘系数R=1；而两种品系无共同的祖先R=0。 重组近交系和重组同类系 Recombinant inbred strain Recombinant congenic strain 把这两种品系进行杂交，产生F1的基因型是均一的A1/A2，B1/B2，C1/C2……；个体各基因位点均是杂合型，又保持了个体遗传均一性，即F1的各个体间血缘系数R=1；还可能出现新的遗传特性。 如近交系NZB和NZW的F1中发现了自身免疫性疾病鼠。