标 记 免 疫 技 术PPT.ppt

（一）斑点ELISA (dot-ELISA) （二）免疫印迹法（immunoblottingtest，IBT） 亦被称为Western blot 分三个阶段进行 : SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS） 电转移 酶免疫定位 免疫印迹法原理示意图 第二节 荧光免疫技术 免疫荧光技术(immunofluorescence technique)是标记免疫技术中发展最早的一种。是将抗原抗体反应的特异性与荧光物质检测的敏感性和直观性结合起来的一种方法。 基本原理 利用荧光素标记抗体，使之在涂片上或组织切片上与标本中的待检抗原特异结合，采用高发光效率的点光源，透过滤色板发出一定波长的光，使结合在标本上的荧光素被激发而产生荧光，借助荧光显微镜观察底物片上荧光染色形态，来判断有无待检抗原或抗体。 一、免疫荧光显微技术 （一）基本原理：使荧光抗体与标本切片中组织或细胞表面的抗原进行反应，洗涤除去游离的荧光抗体后，于荧光显微镜下观察，在黑暗背景上可见明亮的特异荧光。 （二）荧光抗体的制备 （1）荧光抗体的标记 作为标记的荧光素应符合以下要求： ①应具有能与蛋白质分子形成共价健的化学基团，与蛋白质结合后不易解离，而未结合的色素及其降解产物易于清除。 ②荧光效率高,与蛋白质结合后，仍能保持较高的荧光效率。 ③荧光色泽与背景组织的色泽对比鲜明。 ④与蛋白