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第五章 微生物遗传变异与菌种选育 西昌学院 食品科学系 遗传：具有一定遗传型的个体在一定的培养条件下生长时，子代培养物会表现出与亲代培养物相同的特征，这就是遗传现象。 变异：当遗传型发生改变，也就是说当生物体内的遗传物质发生结构上的变化时，生物体就表现出变异现象。 第一节 遗传变异的物质基础 1.证明遗传物质的三个经典实验 转化实验－－－遗传物质是DNA; 噬菌体感染实验－－－证明DNA是遗传物质，且其中含有合成蛋白质的遗传信息; 植物病毒重建实验－－－遗传物质是RNA; 2.DNA的结构与复制 3.遗传物质在细胞中的存在方式 细胞水平 细胞核水平 染色体水平 核酸水平 基因水平 密码子水平 核苷酸水平 第二节 微生物的基因突变 广义的突变 染色体畸变 基因突变（狭义突变） 基因突变：由于DNA链中一对或少数几对碱基发生改变，而导致核苷酸序列突然发生稳定的、可遗传的变化。 1.突变类型 野生型菌株：具有天然的、非突变性状的微生物。 突变型菌株：发生了突变的微生物。 1.1按突变所带来的表型改变 形态突变型（如细菌的鞭毛、芽孢或荚膜的有无） 致死突变型（合成关键性酶的基因发生突变，表现出致死突变） 条件致死突变（如温度敏感型） 生化突变营养缺陷型（缺乏合成必须营养物质的突变型） 抗性突变型（对某种外界因素抗性提高） 1.2按突变的条件和原因 自发诱变 诱发突变 2.突变的特点 不对应性 自发性 稀有性 独立性 诱变性 稳定性 可逆性 3.基因突变的机理与菌种的选育 碱基置换：由于某种化学诱变剂的作用，使DNA分子中一对碱基被另一对碱基所取代。 移码突变：指诱变剂使 DNA 分子中的一个或少数几个核苷酸的增添（插入）或缺失，从而使该部位后面的全部遗传密码发生转录和转译错误的一类突变。 碱基置换 a.转换：DNA链中原有的一个嘧啶被另一个嘧啶所置换，或一个嘌呤被另一个嘌呤所置换； b.颠换： DNA链中原有的一个嘧啶被一个嘌呤所置换，或一个嘌呤被一个嘧啶所置换； 3.1 诱发突变的机理 诱变剂：能显著提高突变的几率的物理或化学因子称为诱变剂。 诱变剂的种类很多，作用的方式也多种多样，但其最终都通过改变遗传物质的结构而导致突变的发生。诱变剂作用于微生物细胞后可产生不同的诱变效应，有些诱变剂能产生多种诱变效应。 3.1.1 辐射类诱变 很多波长较短地射线，如紫外线、x射线、γ射线以及快中子等都有强烈地诱变作用，其中最有效地是波长为260nm左右地紫外线。 紫外线作用于DNA引起结构的变化： DNA链的断链 DNA分子内和分子间产生交联作用 核酸和蛋白质产生交联作用 形成嘧啶水合物和嘧啶二聚体（链内或链间） 对紫外线诱变的修复： 光复活作用 ：经紫外线照射后的微生物暴露于可见光下时，可明显的降低其死亡率的现象。 切割修复作用：不需要可见光的作用，可以修复因形成嘧啶二聚体或因碱基错配等引起的多种DNA损伤。 3.1.2碱基类似物诱变剂 诱变物质通过代谢渗入到DNA分子中去间接地引起碱基对的转换。诱发这类变异的化学物质主要是一些碱基的类似物，例如5-BU。 3.1.2碱基类似物诱变剂(5-BU) 3.1.3 引起DNA碱基发生化学变化的诱变剂 直接与DNA分子中碱基发生化学反应，改变这些碱基的性状，使DNA在下一轮的复制中出现错误配对现象。例如:亚硝酸（氧化脱氨作用）。 第三节 微生物的基因重组 基因重组：是指遗传物质的重排，也即DNA双螺旋直接发生遗传物质的交换。 原核微生物 转化 转导 接合 真核微生物 有性杂交 准性杂交 1.原核微生物 1.1转化:受体菌直接吸收了来自供体菌的DNA片段，通过交换，把该DNA片段组合到自己的基因组中，获得了供体菌的部分遗传性状的现象。 （1）作为转化过程中的受体菌： 可以在其细胞壁上吸附外源DNA； 可以使吸附的外源DAN进入细胞； 细胞内不存在破坏外源DNA的酶； 具备将外来的DNA进行重组的酶系统； （2）用于转化的外源DNA 必须具有较高的分子量，但又不能太大； 完整的双螺旋结构； 在受体菌周围环境中呈可溶的状态； 1. 2 转导 转导：以噬菌体为载体，将供体菌的部分DNA传递给受体菌的过程。需要注意的是，由于噬菌体与其宿主细胞间具有特异性，供体菌和受体菌必须是同种细菌。 普遍性转导 局限性转导 （1）普遍性转导 （2）局限性转导 1. 3 接 合 接合：是指供体菌与受体菌的完整细胞之间直接接触，并通过特殊的附属物而传递大段DNA的过程。细菌的结合作用主要