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[高等教育]第4章 蛋白质的共价结构
第一节、蛋白质的大小与分子量 蛋白质是分子量很大的生物分子 对任一种给定的蛋白质,其所有分子在AA组成和顺序以及肽链的长度方面都应是相同的,即所谓均一的蛋白质。 (2) 结构: 51个氨基酸 分子量:5700-6000 两条链: A链-21肽, B 链-30肽。 3对二硫键 用了大约10年时间和近100g 蛋白质。 2. 核糖核酸酶 3. 人血红蛋白α-和β-链的氨基酸顺序 α-链 141氨基酸 β-链146氨基酸 肌红蛋白链153氨基酸 α-和β-链相同的氨基酸:63个 α-、β-和肌红蛋白三者相同的有19个 一、肽的概念、分类和命名 1. 肽键(peptide bond):一个氨基酸的α-羧基与另一氨基酸的α-氨基脱水缩合而成的键 (二)肽的分类 1.寡肽(oligopeptide):由2-10个氨基酸残基缩合成的肽 2.多肽( polypeptide ) : 由12-50个氨基酸残基缩合成的肽,典型的多肽 Mr 104 3. 蛋白质( protein ):由50个以上的氨基酸残基缩合成的肽, 可由一条或几条多肽链组成生物大分子, Mr 104 (一般以胰岛素的Mr5733为下限) (三)肽的书写法 二、肽键的结构与性质 1.肽键 三、寡肽的理化性质 四、 几种天然存在的活性肽 1、谷胱甘肽( glutathione, GSH ) γ-肽键 GSH与GSSG间的转换 H2O2 2、催产素和升压素 升压素 : 促进血管平滑肌收缩,升高血压、抗 利尿激素 3、促肾上腺皮质激素(ACTH)-39肽 大脑分泌的ACTH参与意识行为的调控; 腺垂体分泌的ACTH主要作用于肾上腺皮质 --刺激肾上腺皮质的生长和肾上腺皮质激素的合成、分泌 从猪脑中分离出一种31肽的具有较强的吗啡样活性与镇痛作用的β-内啡肽。 5、胆囊收缩素 ——一种由33个氨基酸组成的肽 6、胰高血糖素 ——29肽 ? L-Leu-D-Phe-L-Pro-L-Val ? ? L-Orn L-Orn ? ? L-Val-L-Pro-D-Phe-L-Leu ? 短杆菌肽S(环十肽) (毒性较大,LD50为17mg/kg(大鼠腹腔注射),现已很少使用) 生长激素释放抑制激素 10肽 内皮素 21肽 心钠素 28肽 促肾上腺皮质释放激素 41肽 生长激素释放激素 44肽 甲状旁腺素 84肽 神经肽——P物质和脑啡肽 抗生素肽——短杆菌肽A,博莱霉素 10.基因工程产品 神经生长因子 118个氨基酸 γ-干扰素 127~134个氨基酸 α-干扰素 165~166个氨基酸 白细胞介素Ⅱ 133个氨基酸 促红细胞生成素 157个氨基酸 第四节 测定蛋白质一级结构 (测序) 的策略 (1)测定蛋白质分子中多肽链的数目 (2)拆分蛋白质分子的多肽链 (3)断开多肽链内的二硫键 (4)分析每一多肽链的氨基酸组成 √ (5)鉴定多肽链的N-末端和C-末端残基 √ (6)裂解多肽链成较小的肽段(用2种或几种不 同的断裂方法) √ (7)测定各肽段的氨基酸序列 √ (8)利用重叠肽段推断(重建)完整多肽链的氨基 酸序列 √ (9)确定二硫键的位置 1、N-和C-末端氨基酸残基分析 N-末端分析 已学:二硝基氟苯法,丹磺酰氯法,最常用的 为异硫氰酸苯酯法 C-末端分析 (1)肼解法 (2)还原法 多肽链C-末端的氨基酸,可用硼氢化锂还原成相应的α-氨基醇。肽链完全水解后,分析C-末端的α-氨基醇。 (3)羧肽酶法--最有效、最常用 羧肽酶法鉴定肽链C-末端残基及C-末端序列 常用的四种羧肽酶 羧肽酶A、B、C 及 Y --分别来自牛胰、猪胰、柑橘叶、面包酵母 羧肽酶A:当C-末端为Pro、Arg 和 Lys 时,或 倒数第二个是Pro时,该酶
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