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真核生物RNA转录后的加工修饰 一、mRNA的转录后加工 1．加帽(adding cap)： 即在mRNA的5‘-端加上m7GTP的结构 mRNA在真核生物中的初级产物称为HnRNA,由HnRNA转变成mRNA的 加工过程包括加冒、加尾、剪接和内部甲基化等。 此过程发生在细胞核内 加工过程首先是在磷酸酶的作用下，将5‘-端的磷酸基水解，然后再加上鸟苷三磷酸，形成GpppN的结构，再对G进行甲基化 生理意义： （1）保护mRNA的5‘端免收核酸外切酶的降解 （2）帽子能识别真核细胞翻译的起始点 2．加尾(adding tail)： 细胞核内完成 首先由核酸外切酶切去3‘-端一些过剩的核苷酸，然后再加入polyA(20---200个腺苷酸残基） 生理意义 (1)polyA尾可防止核酸外切酶的作用 (2)与mRNA的半寿期有关，稳定整个mRNA分子 3．剪接（splicing)： 真核生物中的结构基因基本上都是断裂基因 结构基因中能够指导多肽链合成的编码顺序被称为外显子 不能指导多肽链合成的非编码顺序就被称为内含子。 真核生物HnRNA的剪接一般需snRNA参与构成的核蛋白体参加，通过形成套索状结构而将内含子切除掉。 4．内部甲基化： 由甲基化酶催化，对某些碱基进行甲基化处理。 真核生物mRNA的转录后加工修饰 真核生物和原核生物转录的主要区别 1、RNA聚合酶种类较多，有RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，且高度分工 2、启动子更复杂多样 3、RNA聚合酶无法识别启动子，靠转录因子识别启动子 4、转录受特点的顺式作用元件和反式作用因子的影响 顺式作用元件---同一DNA分子中具有转录调节功能的特异DNA序列 真核基因的顺式作用元件按功能分为启动子，增强子，沉默子和绝缘子等 5、原核细胞是边转录边翻译，同时进行 真核细胞转录在细胞核，翻译在细胞质，且不同时进行 6、真核细胞被转录的产物要经过非常复杂的后加工。 五、RNA指导下的RNA合成 RNA的复制（噬菌体Qβ） 某些RNA病毒可以以自身RNA为模板进行复制 两个阶段 （1）其单链RNA可充当mRNA，利用寄主中的核糖体合成外壳蛋白和复制酶的β亚基。 （2）复制酶的β亚基可与来自寄主细胞的亚基α?δ自动装配成RNA复制酶，可进行RNA的复制，以分子中单链RNA为模板（正链），复制出一条新的RNA链（负链），再复制出正链，与外壳蛋白组装成新的噬菌体颗粒。 5 ? RNA- 5 ? 3 ? 3 ? RNA+ 释放 释放 3? 5 ? 3 ? 3 ? 5 ? 5 ? RNA+ RNA+ RNA- RNA-及 RNA+的合成方向均为5‘ 3’ 不同的RNA病毒复制方式不同 RNA病毒的复制： 如 HIV病毒、致癌病毒 胞膜蛋白 双分子层 衣壳蛋白 RNA (病毒基因） 破坏免疫识别机制，引起免疫系统失效！----获得性免疫功能障碍综合症 逆转录酶 * * 在真核细胞内有五种DNA聚合酶 （与细菌DNA聚合酶的性质基本相同：底物、模板、引物、方向） α β γ δ ε 定位 细胞核 细胞核 线粒体 细胞核 细胞核 3‘-5’ 外切 - - + + + 酶活性 功能 相当于 原核 DNA-polⅡ DNA-polⅢ DNA-polⅠ 延长随从链\前导链 引物 合成 修复 作用 线粒体DNA 的复制 核DNA 的复制 校读、修复、 填补缺口 五、RNA指导下的DNA合成——逆转录 模板:RNA 原料: dNTPs 产物：DNA 酶：逆转录酶 逆转录酶是一种多功能酶： RNA指导的DNA聚合活力： 可以利用RNA模板，在其上合成出一条互补的DNA链，形成RNA—DNA杂种分子 DNA指导的DNA聚合酶活力： 可以在新合成的DNA链上合成另一条互补DNA链，形成双链DNA分子。 核糖核酸酶H的活力： 专门水解RNA—DNA杂种分子中的RNA 六、DNA的损伤修复 DNA的损伤： DNA在复制时产生错配 病毒基因整合 某些物化因子如紫外光、电离辐射和化学诱变等，破坏DNA的双螺旋结构 DNA的损伤后，影响DNA的复制，并使DNA的转录和翻译也跟