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第二十一章 革兰氏阳性形成芽孢的细菌 岳 华 炭疽芽孢杆菌 (B·anthracis) 炭疽芽孢杆菌惯称炭疽杆菌，是引起人类、各种家畜和野生动物炭疽 (Anthrax)的病原，在兽医学和医学上均占有相当重要的地位。 形态及染色特性 本菌为G +大杆菌，1.0～1.2um×3～5um。无鞭毛，不运动。芽孢椭圆形，位于菌体中央，芽孢囊不大于菌体。可形成荚膜。DNA的G+Cmol%为32.2～33.9。在动物组织和血液中，此菌单在或呈2～5个相连的短链，菌体矢直，相连的两端平截而呈竹节状，围绕以丰厚的荚膜。 荚膜具有较强的抗腐败能力，当菌体因腐败而消失后，仍有残留荚膜显示，称为菌影。在猪体内的此菌形态较为特殊，菌体常弯曲或部分膨大，轮廓不清。动物体内的炭疽杆菌只有当暴露接触空气中的氧气之后，方能形成芽孢。 在培养基中，此菌常形成长链，并于培养18～24h后开始形成芽孢。在普通培养基中不形成荚膜，但若在血液、血清琼脂上或在碳酸氢钠琼脂上，于10%～20%CO2环境中培养则形成荚膜。在葡萄糖琼脂上生长的此菌，细胞内有不能被复红着染的球状小体。 培养特性 此菌为需氧菌，但在厌氧条件下也可生长。可生长温度范围为15～40℃，最适生长温度30～37℃。最适pH为7.2～7.6。营养要求不高，普通培养基中即能生长良好。 在普通琼脂上培养24h后，强毒菌株形成灰白色不透明、大而扁平、表面干燥、边缘呈卷发状的粗糙 (R)型菌落。 无毒或弱毒菌株形成稍小而隆起、表面较为光滑湿润、边缘比较整齐的光滑 (S)型菌落。在血液、血清琼脂平板上或在碳酸氢钠琼脂上，置于5%CO2环境中培养，强毒菌株可形成圆形凸起、光滑湿润、有光泽的黏液 (M)型菌落，无毒菌株和类炭疽菌仍保持其粗糙型特点。在血琼脂上一般不溶血，但个别菌株也可轻微溶血。 于普通肉汤中培养24h后，上部液体仍清朗透明，液面无菌膜或菌环形成，管底有白色絮状沉淀，若轻摇试管，则沉淀物徐徐上升，卷绕成团而不消散。在明胶穿刺培养中，细菌除沿穿刺线生长外，四周呈直角放射状生长，整个生长物好似倒立的雪松状。经培养2～3d后，明胶上部逐渐液化呈漏斗状。 在含青霉素0.5IU/ml的培养基中，幼龄炭疽杆因细胞壁的肽聚糖合成受到抑制，形成原生质体相互连接成串，称为“串珠反应”。若培养基中青霉素含量加至10lU/ml，则完全不能生长或轻微生长。这是炭疽杆菌所特有的，可与其他需氧芽孢杆菌鉴别。 生化特性 此菌发酵葡萄糖产酸而不产气，不发酵阿拉伯糖、木糖和甘露醇。能水解淀粉、明胶和酪蛋白。VP试验阳性，不产生叫噪和H2S，能还原硝酸盐。牛乳经2～4d凝固，然后缓慢胰化。卵磷脂酶阳性或弱反应，苯丙氨酸脱氨酶和磷酸脂酶阴性，触酶阳性。不能或微弱还原美蓝。 抵抗力 本菌繁殖体的抵抗力不强，60℃30～60min或75℃5～15min即可杀死。常用消毒剂均能于短时间内将其杀死，如1:5000洗必泰或消毒净、1/10000新洁尔灭、1:50000度米芬在Smin内可将其杀死。对青霉素、链霉素等多种抗生素及磺胺类药物高度敏感，可用于临床治疗。在末解剖的尸体中，细菌可随腐败而迅速崩解死亡。 芽孢的抵抗力特别强大，在干燥状态下可长期存活。需经煮沸15～25min，121℃灭菌5～l0min，或160℃千热灭菌lh方被杀死。 实验室干燥保存40年以上的炭疽芽孢仍有活力。干燥皮毛上附着的芽孢，也可存活10年以上。牧场一旦被其污染，传染性常可保持20～30年。对于曾经掩埋炭疽兽尸的土地，必须加以 严格控制。开垦后的头1～2年种植黑麦、三叶草等植物，其根系能分泌一种杀死炭疽杆菌的物 质，起到净化土壤的作用。 堆肥中的炭疽芽孢，需温度升至72～76℃经过4d方才死亡。常用的 消毒剂是新配的20%石灰乳或20%漂白粉作用48h，0.1%升汞作用40min或4%高锰酸钾 l5min。炭疽芽孢对碘特别敏感，0.04%碘液l0min即将其破坏，但有机物的存在对其作用有很大影响。 除此之外，过氧乙酸、环氧乙烷、次氯酸钠等都有较好的效果。皮毛消毒可用加有2%盐酸(可使芽孢软化增强消毒效果)的5%食盐水，于25～30℃下浸泡40h，或于室温20～25℃ 和相对湿度40%～68%的室内，按1:44(W/W)的比例将环氧乙烷与溴甲烷混合，以每立方米空间1.5kg的用量熏蒸24h。 抗原结构 已知本菌有荚膜抗原、菌体抗原、保护性抗原及芽抱抗原4种主要抗原成分。 1、荚膜抗原 仅见于有毒菌株，与毒力有关。由D谷氨酷多肤构成，是一种半抗原，可因腐败而被破坏，失去抗原性。此抗原的抗体无保护作用，但其反应性较特异，依此建立各种血清学鉴定方法，如荚膜肿胀试验及免疫荧光抗体法等，均呈较强的特异性。 2