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[基础科学]生物反应器
植物生物反应器 生物反应器: 中文名称:生物反应器 英文名称:bioreactor 定义: 用于生物反应过程的容器总称。包括酶反应器(游离酶和固定酶反应器)、固定细胞反应器、各种细胞培养器、发酵罐和转基因动植物等。可用于制备或生产某些生物反应产物,有的可作为生物传感器。生物工程上的生物反应器是在体外模拟生物体的功能,设计出来用于生产或检测各种化学品的反应装置。 植物生物反应器 随着分子生物学的迅速发展,植物遗传转化技术也不断提高与完善,植物基因工程取得了巨大的成就,通过转基因用植物体表达外源蛋白 (包括疫苗,抗体,药用蛋白)已成为植物基因工程领域内一个研究的热点,正在逐步形成产业化,具有极大的市场前景和商业价值。植物生物反应器就是利用植物这个系统,包括植物细胞,组织器官以及整株植物,通过大规模种植生产具有高经济附加值的医用蛋白、工农业用酶、特殊碳水化合物、生物可降解塑料、脂类及其它一些次生代谢产物等生物制剂的方法。 植物细胞培养反应器 植物细胞培养具有周期长、细胞抗剪切能力弱、易团聚等特点。同时,植物细胞规模培养的目的是生产天然产物,而这些天然产物均为细胞此生代谢物。所以,植物细胞培养反应器的设计,不仅要考虑有利于细胞生长,同时还要考虑有利于产物的积累和分离。总体上讲,适合植物细胞的反应器应该具有适宜的氧传递、良好的流动性和较低的剪切力。根据不同植物细胞生长和代谢产物积累的特点,目前已研究设计出多种类型的反应器用于植物细胞培养。 悬浮培养生物反应器 1机械搅拌生物反应器 尽管机械搅拌反应器已成功用于许多细胞的培养中,反应器内的温度、pH、溶氧及营养物质浓度较其他反应器更易控制等优点,但由于机械搅拌造成的剪切力以对植物细胞造成较大的损伤,对次级代谢产物的合成也会产生影响,同时会带来染菌和机械上的问题,因此需筛选出抗剪切力的细胞系,也可对反应器结构进行改造,尤其是搅拌桨的结构和类型的改进,使其具有缓和、充分的搅拌效果。 2非机械搅拌式反应器 植物细胞的培养比较多地采用各种非机械搅拌生物反应器,其中常用的是气体搅拌生物反应器。气体搅拌生物反应器没有活动的搅拌装置,在很大程度上减少了剪切力,并能在长期操作中保持无菌。气体搅拌生物反应器包括鼓泡塔和气升式反应器等。气体搅拌生物反应器结构较简单,氧传递效率高,剪切力低,对细胞的损伤小,容易实现长期无菌培养,较适用于植物细胞培养。 固定化细胞生物反应器 1填充床生物反应器 细胞可以位于支撑物表面,也可包埋于支撑物之中,培养液流经支撑物颗粒,不断被细胞利用。优点:单位体积固定细胞量大。缺点:混合效果低,对必要的氧传递、pH、温度控制和气体产物的排除造成困难,影响细胞的培养。 2流化床生物反应器 利用液体的能量来悬浮颗粒。颗粒呈流化状态所需的能量与颗粒大小成正比,因此常采用小固定化颗粒,这些小颗粒良好的传质特性是流化床反应器的优点,缺点:剪切力和颗粒碰撞会损坏固定化细胞。 3膜生物反应器 采用具有一定孔径和选择透性的膜固定植物细胞。营养物质通过膜渗透到细胞中,细胞产生的次级代谢产物通过膜释放到培养液中。主要有:中空纤维反应器和螺线式卷绕反应器,优点:可以重复使用。 植物细胞反应器的选择和设计 植物细胞反应器的选择和设计需注意: 1氧的供给对于间歇培养,体积溶氧系数klα需要10-15h-1; 2剪切力反应器的剪切力尽可能小; 3细胞的黏附细胞培养过程容易黏附在反应器壁上,并产生大量的泡沫,导致细胞量和代谢产物减少,严重时培养过程被迫中止; 4细胞高密度培养时,混合情况变差,培养基中营养物质和氧的供给不足,细胞收率下降; 5温度、pH、营养物质的浓度须控制在合适的范围内 有关技术问题 1培养中的植物细胞特性 植物细胞的大规模培养技术是在微生物生物反应器技术的基础上建立起来的,但是植物细胞培养过程的操作条件与微生物培养具有较大的差异。这些差异主要表现在:a、植物细胞的体积与微生物相比要大得多,其平均直径是微生物细胞的30-100倍。b、植物细胞很少单细胞的形式悬浮生长,通常是以直径2mm大小的多细胞团方式存在于培养系统中,由于组成细胞团的细胞数量差异,容易在培养系统中形成非均匀相的集合细胞团。c、植物细胞的纤维素细胞壁虽然使细胞具有很强的抗张强度,却使其抗剪切的能力相当弱。d、植物细胞生产速度慢,因此操作周期厂,因此,植物细胞培养中维持无菌环境的难度也较大。 2植物小培养液的流变特性 对细胞培养液的流变特性的研究资料很少,人们常常用黏度来描述培养的流变学特性。培养过程中培养液的黏度变化可由细胞本身和细胞分泌物引起。 3植物细胞培养过程的O2与CO2调节 所有植物细胞都是好氧气的,培
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