一种适用于教学的SDS—PAGE电泳实验指导.pdf

第28卷 第 3期 实 验 室 研 究 与 探 索 V0lJ28NO．3 2009年 3月 RESEARCH AND EXPLORATION IN LABORATORY Mar．2009 墓蓦i麟簿 量 一 种适用于教学的SDS—PAGE电泳实验指导 李荣华， 孙莉丽， 郭培国， 缪绅裕 ， 陈健辉 ， 谢 国文， 王厚麟 (广州大学 生命科学学院，广东 广州 510006) 摘 要：SDS．聚丙烯酰胺凝胶 电泳 (SDS—PAGE)是一种可靠的分析蛋 白质特性技术。尽管该技术的操 作方法和步骤 已有很多文献作了较为详细地报道，但在指导学生实验 中仍发现很多操作步骤不切合实 际，如制胶过程复杂、操作步骤不清晰等。经过 多年 实践 ，修改了一些 SDS—PAGE的操作步骤，降低 实验 难度 ，提高实验可操作性 ，适合于教学活动。 关键词：SDS聚丙烯酰胺凝胶 ；制胶 ；蛋 白质分析 ；电泳 中图分类号 ：Q5-33 文献标识码 ：A 文章编号：1006—7167(2009)03—0191—04 AnExperimentalInstructionofSDS—PAGE Suitableto EducationaIActivities LIRong—hua， SUN Li—li， GUOPei—guo， MIAOShen—yu， CHEN Jian—hui， XIE Guo—wen， WANGHou—lin (CollegeofLifeScience，GuangzhouUniversity，Guangzhou510006，China) Abstract：SDS—polyacrylamindegelelectrophoresis(SDS—PAGE)isareliabletechniqueusedinproteinanalysis．Based onmanyyears’experience，wemodifysomeproceduresinSDS—PAGE tomakethistechniquemorepracticable．There— fore，theimprovedSDScan beappliedinproteinanalysis，especiallyitissuitabletooureducationalactivities． Keywords：SDS—polyacrylamindegel；castinggel；proteinanalysis；electrophoresis CLCnumber：Q5—33 Documentcode：A ArticleID：1006—7167(2009)03—0191—04 酸钠 (Sodiumdodecylsulfate，SDS)引入凝胶和样 品中， 1 引 言 使蛋 白质在 SDS的作用下变性至线状结构并产生统 自Raymond等 ¨于 1959年 10月在 《科学》杂志 一 的电荷密度 ，因此蛋 白质的在电泳 中的迁移仅与分 介绍丙烯酰胺能在缓冲溶液 中聚合反应 ，形成稳定、透 子大小有关 ，此技术使 PAGE向前迈进重要 的一步。 明、有弹性的凝胶之后 ，科研工作者就尝试该凝胶是否 在此基础上，Laemmli 建立了SDS—PAGE中的不连续 可作为媒介应用于电泳 中来分离蛋白。Raymond 用 凝胶电泳系统 ，使用 Tris缓冲溶液成功分离噬菌体 T4 聚丙烯酰胺凝胶 电泳 (PAGE)成功分离出血清和血红 的蛋白质。这种改进使 SDS—PAGE成为在生命科学研 素 ，随后 Chang等 成功分离链孢霉菌 (Neurospora) 究领域分析蛋 白特性和纯度的一种基础性技术。 的可溶性蛋白质 ，该技术便在蛋 白电泳 中得到 了广泛 广州大学生命科学学院在基础生物化学实验这