[农学]青岛科技大学环境微生物3第三章 微生物的生长于代谢33-34.ppt

3.3微生物的生长繁殖 3.3.1生长与繁殖的概念 3.3.2微生物生长量的测定方法 3.3.3分批培养 3.3.4连续培养 3.3.1生长与繁殖的概念 生长 生物个体由小到大的增长，即表现为细胞组分与结构在量方面的增加 繁殖 微生物个体数目的增加。 3.3.2微生物生长量的测定方法 细胞数目测定 总数测定法 涂片染色法 计数器测定法 电子自动计数法 比浊法 活菌测数法 稀释平板培养法 液体培养法 滤膜培养法 涂片染色法 计数器(血球计数板）测定法 电子自动计数法 （1）制标准曲线（OD~No） （2）测菌液浊度，查图表得出细菌数量 3.3.2微生物生长量的测定方法 微生物生物量的测定 直接观测法 菌落测定法 总重量测定法 总体积测定法 菌体内总要组成测定法 生理指标法 3.3.3分批培养 概念：将少量微生物一次接种于一定容器的培养基中生长培养，最后一次收获。 生长曲线 3.3.3分批培养 细菌生长曲线在污水处理中的应用 生长阶段 生长率上升阶段：延滞期、对数生长期 生长率下降阶段：静止期 内源代谢阶段：衰亡期 3.3.4连续培养 一方面连续进料，另一方面又连续出料。 原理：进料=补足营养(“污染物”) 出料=稀释菌浓度、毒物浓度 分为两种方式： 恒浊连续培养 恒化连续培养。 恒浊连续培养 恒浊——培养基浊度恒定（实质是细菌数量恒定） 恒化连续培养 恒化—— 稀释率D=1 /停留时间 稀释率的影响 稀释（即进料）同时引起反应器内细菌数量的↑↓ 提问：为什么A前D↑代时↓呢？ 应用：废水生物处理中可从混合微生菌中进行高效菌的快速筛选 提问：为什么可以呢？ 混合菌对于同一营养物能否利用，以及利用速率是不同的，代时不同。 3.4环境因素对微生物生长的影响 氧气和氧化还原电位 温度 水及其可供给性 pH 辐射 超声波 化学物质 氧气和氧化还原电位 氧 氧气和氧化还原电位 氧化还原电位 好氧微生物：+300-+400mV,>100mV生长 专性厌氧菌：-200— -250mV，专性产甲烷菌为-300—-600mV 温度 温度对微生物的影响：在适宜温度范围内温度每提高100C，酶促反应速度提高1-2倍。过高温度对微生物有致死作用。 高温的影响 致死温度 致死原因：蛋白质凝固变性，关键细胞器灭活。芽孢耐高温。老龄菌比幼龄菌耐高温 灭菌 低温的影响 不生长也不死亡 代谢极微弱，处于休眠状态 一旦获得适宜温度可恢复活性，以原来的生长速率进行繁殖 水及其可供给性 水的活度(aw) 大多数微生物在aw为0.95-0.99是生长最好 在0.60以下大多数微生物停止活动。 渗透压 在等渗溶液中微生物生长的最好，0.5-0.85%的NaCl溶液。 在低渗、高渗溶液中，对微生物不利 干燥 引起微生物细胞内蛋白质的变性和盐类浓度的增高，抑制微生物的生长，甚至造成微生物的死亡。 保藏菌种 pH 微生物生长也有一个最适生长的pH范围。过高或过低均对微生物不利。 pH引起微生物体表面的电荷改变 pH影响有机物的离子化作用 pH影响酶的活性 辐射 微波 紫外线(UV) X射线和y射线 超声波 空化作用使菌体破坏 频率越高破坏力越强 杆菌比球菌、大杆菌比小杆菌易被杀死，病毒对超声波的抵抗力较强 化学物质 抗生素 思考题 微生物生长曲线个阶段特点及在废水处理中的应用。 各种环境因素对微生物生长影响的机制是什么？ 一些重要的辅酶与辅基 铁卟啉 辅酶A NAD（辅酶Ⅰ）和NADP（辅酶Ⅱ） FMN（黄素单核苷酸）和FAD（黄素腺嘌呤二核苷酸） 辅酶Q 硫辛酸（L）和焦磷酸硫胺素（TPP） 磷酸腺苷和其它核苷酸类（AMP、ADP、ATP、GTP等） 磷酸吡哆醛和磷酸吡哆胺 生物素（维生素H） 四氢叶酸 金属离子 专性厌氧菌（产甲烷菌）的特殊辅酶 辅酶M 辅酶420 辅酶430 甲烷蝶呤（MPT） 甲烷呋喃（MFR） 70-80 40-45 25-30 最高生长温度 25-45 10-20，10-20 -10-5 最低生长温度 50-55 25-30，37-40 10-20 最适生长温度 高温菌 中温菌 低温菌 高温灭菌 干热灭菌法 湿热灭菌法 火焰灭菌法 干燥加热空气灭菌法 常压下 巴氏消毒法 煮沸消毒法 间歇灭菌法 加压下 常规加压灭菌法 (高压蒸汽灭菌法) 连续加压灭菌法 巴氏消毒法 具体方法 低温维持法：只要在63℃下维持30min 高温瞬时法：只要在72℃下维持15s 超高温法：只要在135-150℃下维持2-6s 作用机制 抑制细菌细胞壁合成 破坏细胞质膜 作用于呼吸链以干扰氧化磷酸化 抑制蛋白质和核酸合成 其它有毒有害物质 * * 0.052cm2×25 0.1ml