[工学]第九章 吸光光度法.pptVIP

三、光的吸收定律 透光度(透光率、透射比)T 2.摩尔吸光系数ε的讨论 4.偏离朗伯—比耳定律的原因 （1）物理性因素 非单色光作为入射光引起的偏离 讨论: 讨论: (2) 化学性因素 2.单色器 3. 样品室 二、分光光度计的类型 3.双波长 四、示差分光光度法（示差法） 示差法标尺扩展原理： 五、双波长分光光度法 (4) 为克服非单色光引起的偏离，首先应选择比较好的单色器。此外还应将入射波长选定在待测物质的最大吸收波长且吸收曲线较平坦处。 朗伯—比耳定律的假定：所有的吸光质点之间不发生相互作用。 假定只有在稀溶液(c10-2mol/L)时才基本符合。 当溶液浓度c 10 －2 mol/L 时，吸光质点间可能发生缔合等相互作用，直接影响了对光的吸收。 溶液中存在着离解、聚合、互变异构、配合物的形成等化学平衡时。使吸光质点的浓度发生变化，影响吸光度。 故：朗伯—比耳定律只适用于稀溶液。 作业：P271 1，2 § 9-3 显色反应及显色条件的选择 一、显色反应 测定某种物质时，如果待测物质本身有较深的颜色，就可以进行直接测定，但大多数待测物质是无色或很浅的颜色，故需要选适当的试剂与被测离子反应生成有色化合物再进行测定，此反应称为显色反应，所用的试剂称为显色剂。 1、显色反应的选择 显色反应一般应满足下列要求： a. 选择性好：干扰少或干扰容易消除。 b. 灵敏度高：有色物质的? 应大于104。 c. 有色化合物的组成恒定，符合一定的化学式。 d. 有色化合物的性质应足够稳定，至少保证在测量过程中溶液的吸光度基本恒定。 e. 有色化合物与显色剂之间的颜色差别要大，即显色剂对光的吸收与络合物的吸收有明显区别，一般要求两者的吸收峰波长之差 （称为对比度）大于60nm。 2、显色剂 在光度分析中应用较多的是有机显色剂，有机显色剂分子中一般都含有生色团和助色团。 生色团是某些含不饱和键的基团，如偶氮基（ ）、对醌基、羰基（ =C=0 ）、硫羰基（=C=S）等。 助色团是某些含孤对电子的基团，如氨基（-NH2）、羟基（-OH）、-NR2、-OR、-SH、-Cl、-Br等，这些基团与生色团上的不饱和键相互作用，可以影响生色团对光的吸收，使颜色加深。 无机显色剂：硫氰酸盐、钼酸铵、过氧化氢等。 有机显色剂：种类繁多 (1)偶氮类显色剂：本身是有色物质，生成配合物后，颜色发生明显变化；具有性质稳定、显色反应灵敏度高、选择性好、对比度大等优点，应用广泛。偶氮胂Ⅲ、PAR等。 (2)三苯甲烷类：铬天青S、二甲酚橙等。 a. 磺基水杨酸 属于OO型螯合剂，可与很多高价金属离子生成稳定的螯合物，主要用于测定 Fe3+ 。 磺基水杨酸与Fe3+在p H1.8-2.5时生成紫红色的 b. 丁二酮肟 属于NN型螯合显色剂，用于测定Ni2+。 在NaOH碱性溶液中，有氧化剂（如过硫酸铵）存在时，试剂与Ni2+生成可溶性红色络合物。 几种有机显色剂： c.二苯硫腙 属于含S显色剂，是目前萃取光度测定Cu2+,Pb2+,Zn2+,Cd2+,Hg2+等很多重金属离子的重要试剂。 d.铬天青S 属于三苯甲烷类螯合显色剂，是测定Al3+的很好试剂，在pH 5-5.8的条件下显色。 e.结晶紫 属于三苯甲烷类碱性染料，常用于测定Tl3+。在HBr介质中，试剂与TIBr4-生成有色的离子缔合物，可被醋酸异戊酯萃取。 3、多元络合物 多元络合物是由三种或三种以上的组分所形成的络合物。目前应用较多的是由一种金属离子与两种配位体所组成的三元络合物。 a.三元混配络合物 金属离子与一种络合剂形成未饱和络合物，然后与另一种络合剂结合，形成三元混合配位络合物，简称三元混配络合物。 b.离子缔合物 金属离子首先与络合剂生成络阴离子或络阳离子，然后再与带反电荷的离子生成离子缔合物。 c.金属离子-络合剂-表面活性剂体系 许多金属离子与显色剂反应时，加入某些表面活性剂，可以形成胶束化合物，它们的吸收峰向长波方向移动（红移），而测定的灵敏度显著提高。 d. 杂多酸 溶液在酸性的条件下，过量的钼酸盐与磷酸盐、硅酸盐、砷酸盐等含氧的阴离子作用生成杂多酸，可作为吸光光度法测定相应的磷、硅、砷等元素的基础。 杂多酸法需要还原反应的酸度范围较窄，必须严格控制反应条件。 二、显色条件的选择 酸度对显色反应的影响主要表现为： a.影响显色剂的平衡浓度和颜色 b.影响被测金属离子的存在状态 c.影响络合物的组成 显色反应的适宜酸度是通过实验来确定的。具体方法是：固定溶液中被测组分与显色剂的浓度，调节溶液不同的pH，测定溶液吸光度。用pH作横坐标，吸光度作纵坐标，作出p