[农学]第八讲 农药生物测定.pptVIP

第八讲 农药生物测定与田间药效试验 主要内容： 1、农药的生物测定 2、农药田间药效试验 一、农药的生物测定 1、概述 农药的生物测定：是指利用生物（动物、植物、微生物等）的整体或离体组织、细胞以及细胞中的活性物质（如靶标酶、细胞膜等）对某些化合物的反应如死亡率、抑制率等，作为评价他们生物活性的量度，运用特定的实验设计，以生物统计为工具，测定供试对象在一定条件下的效应。 生物测定涉及的内容和范围： （1）活性筛选的常规测定； （2）农药残留的微量生物分析； （3）抗性毒力测定； （4）药害毒性测定。 2、生物测定试验设计的基本原则 基本要求： 室内测定的药品应该是纯品，至少要有确切的有效成分含量； 供试生物应该是纯种，个体差异小，生理标准较为均一； 确定的环境条件。 （1）相对的控制环境条件 室内应该尽量保持与田间环境条件的一致性； 测定农药的毒力，原则上要求只有两个变数，一个是药剂的剂量或浓度作为自变数，另一个是死亡率或抑制率作应变数； 室内测定：要控制温度和湿度；使用精密的测试仪器及严格的测试方法；供试虫种或菌种要用室内饲养标准化的纯种； 小区试验：应尽量力求所选地区土壤肥力、病虫害分布、作物长势及管理水平等条件均匀相似。 （2）必须设立对照 空白对照：不做任何处理的对照； 不含药剂对照：与药剂处理所用溶剂或乳化剂完全一样，只是不含药剂； 标准药剂对照：用标准药剂作对照。 （3）处理必须设重复 一般至少重复3次。 （4）运用生物统计分析试验结果 3、供试材料 应参考的原则： 在室内人为环境条件下，应用较简便、快速的繁殖技术，可保证全年定时大量供应，不受季节限制； 应是广泛发生为害的主要农林有害生物，具有重要的经济意义，而且在分类地位上有一定的代表性； 对药剂的敏感性符合要求，试验时易操作。 我国常用的生物种类： （1）昆虫和螨类 粘虫、棉铃虫、玉米螟、二化螟、小菜蛾、褐飞虱、棉蚜、豆蚜、米象、杂拟谷盗、家蝇、淡色库蚊、朱砂叶螨等。 （2）病原菌 稻瘟病菌、水稻纹枯病、小麦条锈病菌、甘薯黑疤病菌、黄瓜霜霉病菌、柑桔青霉病菌等。 杂草 野燕麦、稗草、看麦娘、苋、荠菜、播娘蒿、藜等。 4、室内毒力测定的方法 （1）杀虫剂的毒力测定 杀虫剂的毒力测定方法要根据作用方式来设计。 A、常规活体生物测定 a. 触杀作用 喷雾法 如Potter喷雾塔 喷粉法 适用于水生昆虫、储粮害虫、介壳虫及蚜虫、供试昆虫的卵等。 浸液法 点滴法 一般用冷冻法、乙醚处理法、二氧化碳处理法将试虫麻醉。 注射法 药膜法 将定量的药剂均施于滤纸、玻璃板或蜡纸上，形成一个均匀的药膜，再将供试昆虫放在上面爬行一定的时间，然后再转移到正常的环境下，一定时间后观察记录昆虫死亡情况。适用于一切爬行的昆虫和某些飞翔的昆虫（如蚊、蝇等成虫）。 b.胃毒作用 ①饲喂法：饲喂的方法分为无限制给食法及定量给食法；根据饲喂的方式又分为叶片夹毒法及单叶饲喂法。 叶片夹毒法：吞食药量的计算是以试虫吞食叶面积乘以单位面积叶片的剂量（μg/g）。 叶面积计算：方格纸法、叶面积测定仪法、电脑扫描法。 致死中量的求法：按每头虫吞食剂量的大小顺序排列，并标明该剂量下试虫的死活情况，从而将虫划分成生存组、生死组和死亡组。生死组中既有生存的又有死亡的，分别计算生死组中生存个体和死亡个体平均吞食的药量，记为A和B。 A=（生死组活虫剂量总和）/生死组活虫总数 B=（生死组死虫剂量总和）/生死组死虫总数 LD50=（A+B）/2 ②饲饮法 此法适用于蝇、蝽类等有吸食习性的昆虫。 又分为自由饲饮法和强制饲饮法 自由饲饮法：是一种无限制的饲饮方法，让昆虫自己取食配好的混有药剂的糖液，通过测定吸食前后昆虫的重量或药液的体积计算昆虫吸食药剂的量； 强制饲饮法：是将昆虫固定后，将装有药液的移液管口放在昆虫的口边，昆虫吸食到一定的体积后就移开移液管，保证每头虫体吸取药剂的量相同。 c. 熏蒸作用 要求：必须在密闭的条件下进行。 仪器装置：有静止气体的测定装置和有气流出入控制的熏蒸器。 d.内吸作用 直接测定法： 间接测定法：用药液处理植物的局部，一定时间后取未处理的部位加以研磨，稀释成不同浓度的汁液，再放入一定数量的水蚤等观察其死亡情况，利用此法间接测定药剂是否有内吸作用。 e.拒食作用 以昆虫的取食量或昆虫对食物的所食部位和昆虫体重的变化等做的分析，作为药剂对供试昆虫是否有拒食活性的依据。 选择性拒食活性测定：在同一培养皿中交错放入处理叶碟与对照叶碟的方法； 非选择拒食活性测定：在培养皿中仅放入对照或处理叶碟的方法。 f.引诱作用 分性引诱剂、食物引诱剂和产卵引诱剂。 g.驱避作用 其原理与引诱作用相类似。 h.生长发育与生育干扰作用 通过胃毒、接触、熏蒸、内吸等处理方法，观察昆虫蜕皮