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微生物学实验 实验室规则及实验报告的书写 一、实验室规则及注意事项 进实验室必须穿好工作服，离室时脱下反折。非必需物品不要带入实验室。 用过的有菌器材要投入消毒缸，不得放在桌上，亦不可冲洗于水槽内。用过的玻片也应放于含消毒液的器皿内。 爱护公物，节约使用实验材料。实验完毕后，整理桌面，需培养的物品要放入培养箱。做好实验室清洁，关好水电等，洗手后离室。 实验过程中如发生意外，应进行紧急处理。 皮肤破伤：先除尽异物，用蒸馏水或生理盐水冲洗后，涂以2%碘酒。小伤口用创口贴，大的戴手套（到老师处拿）。另建议同学们不要戴戒指，自我保护。 灼伤：涂以凡士林油、5%鞣酸。 菌液进入口腔：应立即吐出，以大量清水漱口，必要时，根据菌类不同服用相关药物进行预防。 菌液流洒桌面：立即报告，以抹布浸沾2%-3%来苏儿后，盖在污染部位半小时方可抹去。若手上沾有活菌，亦应浸泡于上述消毒液3分钟后，再以肥皂水洗。 二、实验报告的书写 目的和要求 实验原理 材料和试剂 步骤和方法 结果和讨论 思考题 实验一 培养基的配制及消毒灭菌 一、目的要求 1. 掌握配制培养基的一般方法和步骤 2. 了解常用的培养基及其作用 3. 掌握消毒，灭菌，防腐，无菌的概念 4. 掌握高压灭菌的原理以及使用方法 5. 熟悉其他消毒、灭菌的方法以及原理 二、实验内容及原理 第一部分 基础培养基的制备 一、培养基： 是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。一般应含有水分、碳源、氮源、能源、无机盐、生长因素等。所以配制培养基时，都要根据不同微生物的要求将培养基的pH 调到合适的范围。 培养基营养六要素 碳源：提供微生物繁殖所需碳元素的营养物质。用途：糖、蛋白质、核酸合成。 氮源：提供微生物繁殖所需氮元素的营养物质。用途：蛋白质、核酸合成。 能源：提供微生物生命活动最初能量来源的营养物或辐射能。 生长素：微生物生长必需，但又不能自行合成的有机物。 无机盐：提供微生物繁殖所需各种重要元素。 水分：水是保证生命活动重要的介质。 培养基的分类 根据微生物的种类和实验目的的不同，培养基分类可以按以下方式： 1、按成分的不同分 2、按培养基的物理状态分 3、按培养基的用途分 1、按照培养基的成分来分 天然培养基 合成培养基 半合成培养基 天然培养基 主要成分是复杂的天然有机物质，是实验室和发酵工厂常用的培养基。 主要原料有：牛肉膏、麦芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麸皮、各种饼粉、马铃薯、牛奶、血清等。 营养全面丰富，使用微生物的生长，来源广泛，价格低廉,具体成分不清楚或不恒定。 合成培养基 用化学成分完全了解的纯化合物药品配制而成的培养基，因此也称化学成分明确的培养基。一般用于研究微生物的形态，营养代谢，分类鉴定，育种选育，遗传分析。 半合成培养基 在以天然有机物作为微生物营养来源的同时，适当补充一些成分已知的化学药品所配制的培养基叫半合成培养基。大多数微生物都能在此种培养基上生长，应用广泛。 2、按照培养基的物理状态 固体培养基 半固体培养基 液体培养基 固体培养基 在液体培养基中加入凝固剂即为固体培养基。一般加入1.5%~2.0%即可（一般为1.8%）。 主要用于微生物的分离，鉴定，活菌计数，菌种保藏等。 固体培养基倒入平皿或者试管中，制成平板或者斜面。 半固体培养基 在液体培养基中加入少量凝固剂即为半固体培养基。例如用琼脂做凝固剂时只需要加入0.2%~0.7%（一般加入0.5%） 此种培养基常用来观察细菌的运动特征、菌种保存和噬菌体的分离纯化及制备等。 液体培养基 不含任何凝固剂，配好后成液体状态的培养基。 广泛用于微生物的培养，生理生化代谢和遗传学的研究以及工业发酵等。 一、理想的凝固剂 不被培养的微生物分解利用 在微生物生长的温度范围保持固体状态 凝固点温度不能太低 对所培养的微生物无毒害作用 凝固剂在灭菌过程中不易被破坏 透明度好，粘着力强 配制方便且价格低廉 二、常用的凝固剂 1、常用： 琼脂、琼脂糖、明胶、硅胶等 2.实验室中最常用： 琼脂：凝固点40℃，熔点：96 ℃ 3、按照培养基的用途分 基础培养基 营养培养基（加富培养基） 鉴别培养基 选择培养基 基础培养基 含有一般细菌生长繁殖需要的基本的营养物质。最常用的基础培养基是天然培养基中的牛肉膏蛋白胨培养基。 这种培养基可作为一些特殊培养基的基础成分。 营养培养基（加富培养基） 鉴别培养基 是一类含有特定化合物或试剂的培养基。某种微生物在这种培养基上培养后，它所产生的某种代谢产物与这种特定的化合物或试剂能发生某种明显的特征性反应，根据这一特征性反应可以将某种微生物与他种微生物区别开来。 主要用于不同类型微生物的生理生化鉴定。 选择培养基 利用微生物对某种