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病毒的增殖与人工培养
病毒的一步生长曲线(One-step growth curve):在细胞培养中接种高MOI 的病毒,使所有细胞同时获得感染,通过分析病毒在整个体系中所有细胞的生长情况,可获得病毒一步曲线试验的结果。图见书P425 病毒周期(Replication cycle): 病毒的复制具有周期性,一个完整的病毒周期包括:吸附、穿入与脱壳、生物合成、组装与释放。 第八节 病毒的复制过程 分为五个连续阶段 * * 病毒的增殖与人工培养 一、 病毒的复制或增殖(Multiplication): 病毒无完整的酶系统,只能依靠宿主活细胞,在原代病毒基因组控制下合成病毒核酸和蛋白质,装配成子代病毒,以不同方式释放出细胞外,再感染其他易感活细胞。 感染比(Multiplicity of infection, MOI):在一个系统中感染病毒的细胞数与细胞总数之比。 .. .. .. .. .. 病毒周期 吸附 穿入 脱壳 生物合成 组装 释放 1. 吸附: 离子间吸附:阳离子(如Mg2+)存在,是随 机、可逆的吸附。 特异性吸附:与细胞上的相应受体结合。P426 2. 侵入: 通过细胞膜吞入—— 病毒胞饮(主要式) 直接穿过、 病毒囊膜与宿主细胞膜融合 3. 脱壳:在溶酶体蛋白水解酶作用下脱壳。 4 . 生物合成: 病毒DNA多在宿主细胞核内合成酸。RNA多在宿主细胞浆内 合成核酸。 5. 装配和释放: 在细胞核内或细胞浆内装配→核衣壳。 释放:A、“出芽”方式释放。 B、宿主细胞破裂。 C、 反吞饮方式释放。 D、在细胞间转移方式感染。 不完全复制: 在多片段基因组的病毒复制过程中,不能完成其全部的核酸或蛋白,缺少某一段核酸或蛋白。 缺损病毒: 缺损了某一段核酸或某个蛋白的病毒颗粒,需要帮助病毒才能完成其复制过程。 第九节 病毒的人工培养 病毒是严格的细胞内寄生物,它的生长繁殖需在活细胞内完成。常用的培养方法有: ① 鸡胚培养法 ② 细胞培养法 ③ 实验动物法
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