《植物学（一）实验》.doc

《 植 物 学 （一）实 验 》 电 子 教 案 青海师范大学生命与地理科学学院 植物教研室 实验一、显微镜的构造和使用方法、植物细胞的装片技术与观察、测量尺的使用 一、实验目的 通过实验掌握显微镜的使用，识别植物细胞的结构，了解植物细胞的后含物和植物细胞的有丝分裂过程，学会临时装片的制作。 二、实验材料 常用光学显微镜、测微尺、植物学实验所用的解剖器具，植物细胞的永久装片、，洋葱，实验试剂（碘液）。 三、实验内容 1、显微镜的构造和使用。 显微镜的构造 显微镜的种类不尽相同，有的简单，有的复杂，而且各有专门用途。本实验课所用的是最常见的复式显微镜（见图1）。它们的基本结构相同，都是由光学部分和机械部分组成。 光学部分：物镜、目镜、镜筒、聚光器和反光镜。 机械部分：转换器、粗准焦螺旋、细准焦螺旋、镜臂、载物台（镜台，上面装有压片夹或移动标本制片的推进器）、镜柱、倾斜关节、镜座。 显微镜成像原理 显微镜能够成像主要是依据凹透镜成像原理，物像的扩大主要是物镜和目镜的作用。 首先，利用反光镜将可见光反射到聚光器中，把光线汇聚成束，穿过生物制片（样品）射向物镜的透镜上，经透镜折射而在物镜与目镜之间形成生物制品结构的放大倒实像。这一倒的实像经过目镜的放大而形成倒的放大虚像。这个倒的放大虚像映入眼球内，在视网膜上形成正的像。由于人们的视觉习惯而产生倒像感觉。换句话说，用显微镜观察样品，我们所看到的是样品结构放大的倒像（见图2）。从以上成像过程可知，显微镜的放大倍数由目镜、物镜和镜筒的长度决定。镜筒长度一般为160mm，显然放大倍数主要由物镜和目镜来决定。通常显微镜、物镜与目镜上都刻有放大倍数，一般目镜越短，放大倍数越高，物镜越长，放大倍数越大。理论上显微镜具有的物、目镜放大倍数及它们之间的组合乘积为的放大倍数。理论上显微镜的最大倍数可以达到2 500倍，但是目前由于可见光波长和制造工艺的限制，虽能放大到2 500倍，但分辨率无保证，因此最好的显微镜最高的有效放大倍数只能达到1 000倍左右。有时说一架显微镜可以放大2 000倍，这只不过是“能够”放大到这个倍数，并不标志此时的像是清晰的，也许只看见一个放大的模糊影像。 显微镜的使用 （1）取用、放回等搬动显微镜时，必须一手握持镜臂，一手托住镜座，使镜身直立，不可用一只手倾斜提携，以免摔落目镜、反射镜以及镜座。 （2）要轻拿轻放。将显微镜置于实验台上时，镜臂朝向自己，略偏向左方距实验桌的边缘约30mm处，右侧可放记录本或绘图纸等。 （3）使用显微镜前，首先要调节好光线，在实验室可以利用灯光或自然光，但不能用直射的阳光，以免损伤眼睛。首先转动转换器，使目镜、低倍物镜（通常是10×物镜）和通光孔成一直线，然后转动粗准焦螺旋，使物镜与载物台相距7~8mm，接着先把聚光器提上，打开可变光栏，在用左眼观察目镜中视野的同时，转动反光镜，使视野的光线最明亮、最均匀。如果靠近光源或光源较强，可用平面的反光镜；如果光源距离较远或光源较弱，可用凹面的反光镜。 （4）把要观察的切片置于载物台上，用推进器或手移动载玻片，使标本正对通光孔的中央（若无推进器的，移动后应用压片夹固定）。接着用左眼观察，若没看见标本，可慢慢旋转粗准焦螺旋，使镜筒慢慢上升，直到能看清标本为止。此时若物像不在视野中央，可移动载玻片，使标本物像出现在视野中央。移动时就记住显微镜中形成的物像是放大的倒像，故改变图像在视野中的位置时，需要朝相反的方向移动，或叫“对着干”，即偏右了向右移动玻片。反之亦然。然后再用细准焦螺旋进行调节。（注意：细准焦螺旋是显微镜上机械部件中最易损坏的部件，要尽量保护。通常使用低倍物镜观察时，用粗准焦螺旋调焦就可以得到满意的效果，在此情况下，尽量不用或少用细准焦螺旋。使用高倍物镜如需要用细准焦螺旋调焦时，转动量也最好不要大于半圈。） （5）进行观察时，一定要双眼睁开，做到左眼观察，右眼看绘图，同时要先从低倍镜下观察起。先了解制片上切片的情况，如需详细观察制片中某一部分的细微结构，则先在低倍下找到合适的位置，并移到中央，然后转动镜头转换器，用较高倍的物镜观察。如尚需要用更高倍的物镜进一步观察某一部分的结构，则可重复以上步骤。在观察过程中，由于材料、目镜、物镜放大倍数等不同，所需光线强弱也不同，则靠调节聚光器上、下位置和光栏光圈大小来实现。 （6）本实验通常使用高倍物镜，基本上能达到目的。如观察材料欲放大1000倍以上时，则需使用油浸物镜（即100×）。使用油镜时，采用的目镜跟使用其他倍数的物镜时一样，可用10×，15×，25×等。观察时必须先用高倍物镜找到要观察的部位，调至视野中央后，再转动粗准焦螺旋。提高镜筒，转动镜头转换器，使油镜头与镜筒相对，然后在所