检测技术方法20120512PPT.ppt

免疫检测分析技术2012年5月;免疫测定的发展;如何区分不同的检测方法;酶联免疫（ELISA ）基础知识;免疫检测的基础知识 ;免疫检测的基础知识 ;酶联免疫法;酶联免疫法;*;酶联免疫法;酶联免疫法;酶联免疫法;酶联免疫法;酶联免疫法;ELISA检测方法;夹心法;双抗原夹心法示意图;夹心法;;ELISA的测定模式;间接法;;间接法测抗体;间接法;竞争法;竞争法测抗体;TMB +H2O2;捕获法;固相捕获法测IgM抗体;ELISA试剂盒组分;酶标板;包被的方式 ;包被用抗原 ;包被用抗体 ;包被的条件 ;封闭 ;结合物 ;酶 ;结合物的制备 ;结合物的制备 ;结合物的保存 ;结合物的稀释液 ;酶的底物 ;洗涤液 ;酶反应终止液 ;阳性对照品和阴性对照品 ;参考标准品 ;ELISA的操作要点 ;标本的采取和保存 ;标本的采取和保存 ;试剂的准备 ;加样 ;温育;温育;温育;洗涤 ;显色 ;测量;质量控制;误差 ; 真值 ;准确度;精密度;标准品;质量控制血清 ;室内质量控制程序;;酶免疫测定操作中的注意事项;标本的收集和保存;试剂准备;加 样;温 育;洗 板;显 色;比 色;结 果 判 断;定性？定量？;定性测定结果确定的依据;概 念;概 念;测定结果的报告和数据处理 ;定义;定义;定义;定义;1. 不需r-计数器、荧光显微镜、酶标检测仪等贵重仪器， 更适用于现场应用。2. 没有诸如放射性同位素、邻苯二胺等有害物质的参与， 更加安全。3. 实验结果和金标探针可以长期保存。4. 自带质控对照，不需其它试剂。5. 由于省去了底物反应这一步，因此和EIA相比，时间大 大缩短，简单快速，可单人份操作。6. 由于操作简单快速，可用于个人或家庭检测。; 胶体金即金的水溶液，是一种带负电荷的疏水胶体溶液，颗粒之间由于静电作用而保持一个稳定的胶体状态，可通过还原剂将氯化金分子聚合成特定大小的金颗粒来制备。胶体金通过静电及其表面的物理特性与多种生物大分子结合，形成蛋白质-金颗粒复合物，即胶体金探针。; 采用化学还原法，其过程可以认为是一个结晶过程，颗粒的大小取决于还原剂所致晶核的形成速度和结晶生长速度。目前主要有以下几种制备方法??;WT;试纸条工作原理;三、试纸条的结构及制造工艺;试纸条结构示意图;工艺流程;1. 原料处理应用 单抗预处理：透析、浓缩 点样：检测线、对照线、金标抗原 包被：交联、封闭、其他处理;4. 中间检测 点样均一 原材料完整、无破损 粘贴整齐;胶体金及其特点;试纸条工作原理(HIV为例);使用金标法试剂的注意事项