bfgf%2f壳聚糖衍生物%2f胶原复合水凝胶对mdpc6t作用的研究.pdfVIP

结论： 1、磺化壳聚糖较磷酸化壳聚糖的溶解性能更加出色。 2 、β-甘油磷酸钠的投放剂量控制在8-10 %范围时，复合水凝胶适宜作为生长因 子和种子细胞的载体。 第二部分 bFGF/壳聚糖衍生物/胶原复合水凝胶生物学检测 目的： bFGF/壳聚糖衍生物/胶原复合水凝胶对成牙本质细胞样细胞(mDPC6T)的生 物相容性，细胞在水凝胶材料中的形态观察，bFGF/壳聚糖衍生物/胶原复合水凝 胶应用于成牙本质分化与修复的评估。 方法： 1、筛选出bFGF 作用成牙本质细胞的有效浓度。 2 、将成牙本质细胞接种于水凝胶表面，利用细胞骨架染色观察水凝胶对细胞的 粘附作用以及生物相容性。 3、CCK-8 法观察将细胞接种于不同复合成分的水凝胶表面后的增殖表现并绘制 生长曲线。 4 、通过细胞分化与矿化程度的比较来观察水凝胶与bFGF 之间是否存在一定的 协同作用。 结果： 1、当bFGF 浓度为12.5-25 ng/ml 时，具有促进mDPC6T 增殖的作用。 2 、接种在单纯胶原水凝胶和壳聚糖衍生物/胶原复合水凝胶表面的mDPC6T 存 在不同程度地铺展，伪足延伸充分，可见丝状细胞骨架以及细胞骨架蛋白显 著表达。 3、 bFGF/PSCS/胶原复合水凝胶组对mDPC6T 细胞增殖的促进效果较其他组别 更为显著。同时bFGF/SCS/胶原与bFGF/PSCS/胶原复合水凝胶组随着时间 的延长，增殖效果更加明显，增殖速率保持更快。 II 万方数据 4 、ALP 染色和ALP 活性测定一致显示bFGF/PSCS/胶原复合水凝胶组较其他组 别对mDPC6T 细胞促分化作用更为明显。 5、茜素红染色显示7 d，bFGF 参与的组别生成较多的红色矿化结节。而14 d 时， 未包埋的bFGF 的组别矿化结节的生成量多于bFGF 组。 结论： 1、bFGF 浓度在12.5-25 ng/ml 时对成牙本质细胞样细胞的作用最为显著。 2 、壳聚糖衍生物/胶原复合水凝胶具有出色的生物相容性以及对细胞具有良好的 粘附作用。 3、磺化基团的引入能有效提高复合水凝胶支架材料的生物学活性。 关键词： 水凝胶；磺化壳聚糖；磷酸化壳聚糖；成牙本质；碱性成纤维细胞生长因子 III 万方数据 ABSTRACT The present study was aimed to develop a novel bFGF/Chitosan derivatives/collagen composite hydrogel scaffold and to test the physical and chemical properties. By in vitro cell culture,the biocompatibility and odontoblast differentiation of this hydrogel to mouse dental papilla cells(mDPC6T) are evaluated. Furthermore, to detect the synergy between bFGF and Chitosan derivatives/collagen composite hydrogel as well as the potential of the