[理学]30DNA复制与损伤修复1.pptVIP

DNA聚合酶的活性 5′至3′的聚合活性 5′→ 3′方向 核酸 外切酶活性 5′→ 3′外切酶活性 3′→ 5′外切酶活性 核酸外切酶活性和即时校读 DNA-polⅠ，Ⅱ的3′→ 5′外切酶活性 复制的保真性和碱基选择 pol Ⅲ 的ε亚基 先形成氢键，再生成磷酸二酯键 依赖三种机理 1 遵守严格的碱基互补配对规律 2 聚合酶在复制延长中对碱基的选择功能 3 复制中出错时有即时校读功能 5′至3′的聚合活性（ 5′→ 3′ ）  核酸外切酶活性 3′→5′外切酶活性 5′→3′外切酶活性 (一)原核生物DAN聚合酶（DNA polymerase) pol Ⅰ，分子量：103000,一条多肽链，不是复制主要的酶。用枯草杆菌蛋白酶可切成2个片段其中： 小片段 5′→ 3′核酸 外切酶活性 大片段 （Klenow片段）聚合活性、 3′→ 5′外切活性 常用的工具酶， （二）真核生物（DNA-pol）： α 与随从链的合成有关 β 核酸外切酶活性 与修复有关 γ 存在于线粒体 δ 与领头链的合成有关 ε 与校读、修复和填补缺口有关 真核生物的端粒和端粒酶 端粒(telomere) 是真核生物染色体线性DNA分子末端的结构 富含GC的重复序列 人：(TTAGGG)n 端粒酶(telomerase) RNA--蛋白质复合物 既有模板，又有逆转录酶 以自身的RNA为模板延长DNA单链，然后反折为双链, 爬行模式 端粒酶与生物体的衰老、肿瘤的发生有关 五、逆转录现象和逆转录酶 RNA病毒 逆转录酶(reverse transcriptase, RT) 逆转录活性 RNaseH 活性 DNA聚合酶活性 DNA连接酶（ligase） （三）DNA复制的拓扑性质 及其拓扑异构酶 解螺旋酶(helicase) 领头链 rep蛋白 Dna B 随从链 解链酶II 3’ 5’ Rep 蛋白 解旋酶II 5’ 3’ 5’ 3’ SSB 前导链′ 滞后链 DNA旋转酶—拓扑异构酶II (四）DNA复制过程 1.复制的起始 大肠杆菌的复制起点oriC,由245个bp组成。关键序列是3个13bp的重复和4个9bp的重复。 引物酶和引发体 引物酶 RNA聚合酶 Dna G（RNA聚合酶） 引发体 Dna A辨认复制启始点，再结合Dna B,Dna C及其他复制因子形成复合体 2.DNA复制的延伸 3.复制终止 四、DNA的损伤修复 错配修复（mismatch repair) 直接修复（direct repair) 切除修复（excision repair) 重组修复（recombination repair) 易错修复（error-prone repair) GATC CTAG CH3 A GATC CTAG GATC CTAG GATC CTCG G C G A G C 1.错配修复机制 GATC 2.直接修复（光修复） 紫外光照射可使相邻的两个T 形成二聚体 光修复酶可使二聚体解聚为单体状态，DNA完全恢复正常。光修复酶的激活需300-600μm波长的光。 3.切除修复 参与的酶有 核酸内切酶，polⅠ　,DNA连接酶 4.重组修复 重组蛋白RecA，polⅠ，连接酶参与　　 损伤会保留下去 5.SOS修复 DNA损伤面太大，复制难以继续。 复制，修复的酶，重组蛋白RecA，调控蛋白LexA等组成一个庞大的调控网络。 特异性很低，突变被保存下来。 着色性干皮病　患者缺乏特异的核酸内切酶，紫外光照射后易患皮肤癌 * * 第二十四章、DNA的复制和修复 基因(gene)--是为生物活性产物编码的DNA功能片段，这些产物主要是蛋白质或是各种RNA。 中心法则： ----当细胞分裂, DNA进行复制时，双螺旋结构解开而成为单链，用于合成新的互补链。子代细胞出现新的DNA双链，其中一股单链是从亲代完整地接受过来的。另一股单链完全重新合成，且按碱基配对原则互补。 一、半保留复制(semiconservative replication) DNA半保留复制的证据一： DNA半保留复制的证据二： 未复制的DNA 已复制的DNA 已复制的DNA 二、DNA复制的起点(origin)和方式 1.DNA复制的起点： 基因组（全部染色体DNA)中能独立复制的单位称复制子（replicon）。 控制复制起始的序列为复制起点，同时也是复制开始的位点(start).复制一旦起始，它将继