StepOne软件操作简易指南.pdf

StepOne™ Real-Time PCR System 简易操作指南 ™ Applied Biosystems StepOne Real-Time PCR System 简易操作指南 美国应用生物系统公司 StepOne™ Real-Time PCR System 简易操作指南 StepOne 定量 PCR 仪简易设置指南 1启动电脑，打开定量PCR仪电源开关，双击桌面“StepOne Software”图标， 出现Login登录界面，点击“OK”，打开软件。 2 起始界面如图所示，点击红色椭圆的三角图标，展开软件功能按钮。 StepOne™ Real-Time PCR System 简易操作指南 3 点击左侧“Set Up”功能选项中的“Advanced Setup”高级设置向导。 4 在打开的设置界面，左侧为导航树，选择不同的功能选项，右侧显现为不同的 设置功能。默认条件下，显示为“Experiment Properties”实验属性。 StepOne™ Real-Time PCR System 简易操作指南 5 右侧界面，带有红色*号位置需要输入或者通过鼠标进行选择。不带*号位置为 选填，可以保持空白。在途中位置输入实验名称，该名称根据需要进行填写。 6选择仪器类型、实验类型、荧光标记方法以及反应速度。 StepOne™ Real-Time PCR System 简易操作指南 7 左侧导航树，选择“Plate Setup”设置选项。右侧“Define Targets”选项 下“Target Name”处设置检测基因的名称，如FluA，Reporter下拉菜单选择“FAM”， Quencher下拉菜单选择“None”。 8 点击“Add New Target”，并按照第 7 步所述进行设置。根据需要添加所需基 因，如SWH1、SWFluA1和RNP。 StepOne™ Real-Time PCR System 简易操作指南 9 在“Define Samples”填写检测样本的名称，如果需要多个样本，通过“Add New Sample”添加多个样本。 10 鼠标点击“Assign Targets and Samples”切换设置界面。鼠标滑倒图中椭 圆所处位置，变化为双向箭头，通过拖动鼠标，可以改变左右两侧窗口大小。 StepOne™ Real-Time PCR System 简易操作指南 11 鼠标选择样品放置的位置，如B4，鼠标勾选样品名称及所要检测的基因。根 据样品孔的数量，依次进行设置。 12 鼠标拖动椭圆位置，向下拖动。在“Select the dye to use as the passive reference ”的下拉菜单处选择“None”。 StepOne™ Real-Time PCR System 简易操作指南 13 点击“Run Method”设置反应条件。在“Reaction Volume Per Well”处输 入反应体积，如20ul或者25ul。点击温度或者时间，通过输入数值可以更改温 度的大小及时间的长短。在“Number of Cycles”可以输入循环数。 StepOne™ Real-Time PCR System 简易操作指南 14根据试剂盒的说明书，改变反应条件。在软件上，Stage指温度阶段，有Holding Stage和 Cycling Stage两种类型。Holding Stage只有一个Step（温度步骤）， Cycling Stage 可以有几个 Step（温度步骤），并且多次循环该温度参数。点击 “Add Stage”可以选择添加Stage及类型。 15 在 Cycling Stage 可以添加 Step（温度步骤），选中某个温度步骤，如黄色