[高等教育]天然有机化学--第5章黄酮.pptVIP

四. 黄酮类化合物的结构分析 黄酮类化合物分析的一般步骤： (1). 与标品或文献对照熔点值，纸层析或薄层层析得到的Rf值。 (2).分析对比样品在甲醇溶液中，及加入酸碱或重金属盐类(如AlCl3)等试剂后得到的紫外光谱。 (3).解析样品或其衍生物的核磁共振谱。 (4).进行质谱分析或进行必要的降解合成，以求最后确证。 有些黄酮苷比较复杂，常先水解黄酮苷，分别分析水解下来的糖和苷元的结构，再来确定黄酮苷的结构。 1.黄酮苷的水解 (1)?酸水解 用HCl，H2SO4，HOAc，HCOOH等水解， 酸的种类与浓度、水解温度、反应时间的选择，由水解的要求和苷的结构所决定。 黄酮C-苷在一般水解条件下是不能被水解的。 例木糖基异牡荆苷的水解：2mg木糖基异牡荆苷溶于10%HOAc中，室温18h，减压蒸馏，残渣进行纸层析，其单一色点，与异牡荆苷水解后的色点一致。用木糖，葡萄糖作标样对比。 （2）酶水解 一种温和、专一、简便的方法。常用水解酶，β-葡萄糖苷酶、β-葡萄糖醛酸酶、α-鼠李糖苷酶和花青苷酶等。 水解规律：大多数黄酮如3位、4’位、7位葡萄糖苷易水解，只需几分钟。黄酮醇3位糖苷，37℃需24h以上才能水解。 例木犀草7-β-D-葡萄糖苷的水解，1mg溶于2ml pH5的缓冲溶液中，加1mg β-D-葡萄糖苷酶，37℃，放10h，减压浓缩，用纸层析检测。 2.糖的分析 水解下来的糖大多为已知糖，可用纸层析、气相色谱等鉴定，同时与已知糖的标准品对照。 (1) 纸色谱 操作快，准确度较高，成本低。但不能分辨α-糖和β-糖。 常用展开剂：正丁醇/乙酸/水(4:1:5)、正丁醇/乙酸/乙醇/水(4:1:1:2)、水饱和的苯酚、乙酸乙酯/吡啶/水(12:5:4)等。 (2) 气相色谱 首先制备成三甲基硅醚衍生物或全甲基化衍生物，再进行气相色谱鉴定，并与已知糖的相应衍生物对照。气相色谱灵敏度较纸色谱高，可分辨别α-糖和β-糖，例α-鼠李糖比β-鼠李糖的滞留时间小。但分子量大的糖不能分析。 3.苷元的鉴定 苷元的的鉴定一般通过衍生物的制备、谱学解析即可完成。如果有己知物的标准品，再经过混合熔点测定、红外光谱对照等，使鉴定更另可靠。 (1)衍生物的制备 黄酮类化合物常用衍生物：乙酰化物和甲基化物。 制备衍生物的目的有两个： ① 与文献中己知化合物的理化数据（包括谱学数据）对照，加以鉴定； ② 是将这些衍生物与原化合物的谱学数据进行比较而推定结构。 例如：酚羟基乙酰化后，可使羟基对紫外光谱的贡献消失，并可使邻、间、对位质子的1H-核磁共振信号向低场位移0.3、0.15、0.5ppm，以此可推定羟基的取代位置。此外，乙酰化或甲基化后使各种谱学数据的测定更加容易，因此，不管是已知物鉴定，还是未知物的结构分析，这两种衍生物的制备都是不可少的。 ① 乙酰化物的制备 羟基乙酰化：乙酐或乙酰氯；常用催化剂：吡啶、乙酸钠、浓硫酸、对甲苯磺酸等，所用试剂都必需无水。 方法：将样品溶解于少量无水吡啶中，加两倍量乙酐，室温放置3~5天，然后将反应物倒入冰水中，静止数小时后析出结晶，过滤后以适当溶剂重结晶即可。该法的优点是方法简便、反应温和，几乎能定量地得到反应产物。 ② 甲基化物的制备 酚羟基甲基化：重氮甲烷，硫酸二甲酯 方法：样品溶于甲醇或乙醚中，加入过量的重氮甲烷乙醚溶液，在通风橱中放置过夜。薄层检查反应如不完全，继续加入过量重氮甲烷乙醚液，直至反应完全为止。蒸去溶剂后以适当溶剂重结晶。该法的优点是反应产物便于处理，产量高，但5-位羟基因生成氢键不易甲基化，可改用硫酸二甲酯或其它方法甲基化。 (2) 谱学数据的测定 由于一般的黄酮类化合物结构比较简单，用紫外光谱、核磁共振谱、质谱分析，必要时制成衍生物进行测定，即可推出结构。 ① UV 多数黄酮类化合物在240~400nm范围有二个主要吸收带：带Ⅰ：300~380nm，是由B环桂皮酰基系统的电子跃迁引起的吸收；带Ⅱ：240~280nm ，是A环苯甲酰基系统的贡献。 一些黄酮类化合物(甲醇中)紫外光谱特征：黄酮及黄酮醇类的带Ⅰ、带Ⅱ皆为强峰；异黄酮、二氢黄酮和二氢黄酮醇是Ⅰ弱Ⅱ强(带Ⅰ常为肩峰)；查尔酮及橙酮类为Ⅰ强Ⅱ弱。 位移试剂作用：根据光谱的变化，可以推测酚羟基等取代基的位置及数目。例：黄酮、黄酮醇，甲醇钠可推测有无4’-OH或3-OH，乙酸钠可推测7-OH，乙酸钠-硼酸可确定有无邻二