由于基因突变.PPTVIP

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由于基因突变

化学诱变剂 烷化剂:亚硝基胍、甲基磺酸、亚硝酸等 碱基类似物: 5-溴尿嘧啶、 6-氨基嘌呤等 嵌合剂:吖啶类染料、溴化乙锭等 抗生素:丝裂霉素C 、放线菌素D等 烷化鸟嘌呤与胸腺嘧啶错误配对 大多数情况下,就突变数量而言,要比电离辐射更有效。 经济的,因为只需要少量的合适的诱变剂,设备是实验室的一般玻璃器皿,一个蒸气罩。 大部分诱变剂是致癌剂 化学诱变剂的优缺点: 诱变育种工作中应考虑的原则 选择简便有效的诱变剂:方便、高效 选择合适的出发菌株:产量高、对诱变剂的敏感性大、变异幅度大  处理单孢子(细胞)悬液 生理状态 选用最适剂量  充分利用复合处理的协同效应 设计和采用高效筛选方案: 诱变处理后,突变细胞只占存活细胞的百分之几,而能使生产状况提高的细胞又只是突变细胞中的少数。 ?初筛:目的是删去明确不符合要求的大部分菌株,把生产性状类似的菌株尽量保留下来,使优良菌种不致于漏网。以量为主,测定的精确性还在其次,手段应尽可能快速、简单。 复筛:确认符合生产要求的菌株,以质为主,应精确测定每个菌株的生产指标  杂交育种 是指将两个基因型不同的菌株经吻合(或接合)使遗传物质重新组合,从中分离和筛选具有新性状的菌株。 部分的定向育种 局限性 原生质体融合 用脱壁酶将微生物细胞壁除去,制成原生质体,再用聚乙二醇(PEG)促进原生质体发生融合,从而获得融合子,它保持原细胞的一切活性 基因重组的一种重要方法  分子育种 是运用体外DNA技术获得目的基因,再借助于载体,将目的基因转移至新的宿主细胞并使其在新的宿主细胞系统内进行复制和表达,从而使一个细胞的优秀性状转移给另一个细胞的方法 定向育种 菌种保藏 原理: 挑选优良纯种,最好采用它们的休眠体(如孢子、芽孢等) 创造一个适合其长期休眠的环境条件,诸如干燥、低温、缺氧、避光、缺乏营养以及添加保护剂等 菌种保藏的基本措施是低温、干燥、真空 菌种保藏常用方法 1、定期移植保藏法 斜面菌种低温保存,每隔一定时间重新移植培养一次 特点:  操作简单、保存时间短(2-6个月)、易发生变异 2、矿油(液体石蜡)保藏法 在斜面培养或穿刺培养上加一层液体石蜡,液体石蜡可以防止失水干燥,隔绝空气,降低菌种细胞代谢速率 适用于各类微生物,尤其是不形成芽孢或孢子的真菌 保藏期限1-8年以上  3、沙土保藏法 将细土与沙按1:2(W/W)混合,经灭菌后,将微生物孢子附着在上面进行干燥,然后加以保存  抗生素工业生产中应用最广 可保存1-数年  4、真空冷冻干燥保藏法 细胞加入保护剂,在真空条件下冰冻,使样品中的水分直接升华为蒸汽,达到干燥状态 保藏期可达1-20年以上    5、液氮冷冻保藏法  液氮(-196℃)  最可靠长期保存方法(1-10年以上)  缺点是需要特殊设备   菌种保藏的注意事项 防止杂菌污染,并一定要做无菌检查。 防止菌种退化,及时采用有效方法复壮、传代  最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC):在特定环境下孵育24小时,可抑制某种微生物出现明显增长的最低药物浓度即最小抑菌浓度,用于定量测定体外抗菌活性 * 1、干扰细菌细胞壁的合成:如青霉素类、头孢类、D-丙胺酸多肽转移酶抑制剂。   2、影响细菌蛋白质的合成:如四环素、氨基糖苷类、大环内酯类、氯霉素类。   3、抑制细菌核酸的合成:如利福平。   4、损伤细胞膜:如多肽类、多烯类。 * Ames试验全称污染物致突变性检测 * 现代发酵的定义应该是:通过对微生物(或动植物细胞)的进行大规模的生长培养,使之发生化学变化和生理变化,从而产生和积累大量人们发酵所需要的代谢产物的过程。 * 抗生素 抗生素的发现和发展 生物的拮抗现象 抗生素(antibiotics) 一、 定义 原始含义:由微生物产生的、能抑制其它微生物生长的物质。 现指:生物(包括微生物、植物和动物)在其生命活动过程中产生的(或由其它方法获得的)、能在低微浓度下有选择性地抑制或影响它种生物机能的有机物质。 抗生素的命名原则 按照生物种属名进行命名:青霉素,链霉素,蒜素,鱼素 按照化学结构:四环素,氯四环素,重氮丝氨酸 俗名或产地:庐山霉素,创新霉素,金霉素,土霉素 差异毒力:对微生物或肿瘤细胞等靶细胞的抑制或杀灭作用与对机体损害程度的比较 抗菌谱:指抗生素能够抑制微生物的范围和剂量。 最小抑菌浓度 药用抗生素的要求 细菌产生的抗生素 放线菌产生的抗生素 真菌产生的抗生素 植物和动物产生的抗生素:蒜素,鱼素 按产生来源分类 ?-内酰胺类—青霉素、头孢菌素等 四环类—四环素、土霉素、金霉素 氨基糖苷类—链霉素、卡那霉素、庆大霉素 大环内酯类—红霉素、螺旋霉素、麦迪霉素 多肽类—多

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