牛病毒性腹泻与粘膜病演示课件.pptVIP

牛病毒性腹泻与黏膜病 牛病毒性腹泻，又称牛病毒性腹泻/粘膜病，是由BVDV引起的，主要侵害牛、羊、鹿、牦牛等反刍动物及猪的一种重要传染病。临床主要表现为发热、粘膜糜烂、溃疡、白细胞减少、持续感染、咳嗽及怀孕母牛流产或产生畸形胎儿。同一种病原引起的多种病状的传染病 我国1980年李佑民首从国外进口奶牛分离出BVDV；上世纪90年代郑志刚等在全国范围内调查，BVDV平均阳性率为19.56%，近年来本病在国内阳性检出率呈逐年上涨的趋势。本病给养牛业造成明显损失（产乳↓、重↓、流产等）。 牛病毒性腹泻 1 BVDV的流行病学 2 BVDV的病原学 3 BVDV的基因结构及其蛋白 4 BVDV的研究进展 内容摘要 5 6 BVDV的防治 BVDV的主要诊断方法 BVDV的流行病学 传 染 源：病牛和带毒牛是主要传染源。 传播途径：主要通过消化道和呼吸道传播；直接或间接接触也可以传播；吸血昆虫也是重要的传播媒介。 易感动物：主要感染牛（肉牛、奶牛），也可感染猪。 本病多发于寒冷季节，过分拥挤可促进本病发生。 BVDV的病原学 属黄病毒科、瘟病毒属 有囊膜，直径25-30nm，正链RNA 胎牛肾、睾丸、猪肾、胎羊睾丸可增殖传代 BVDV。BVDV 可以分成致细胞病变型（CP）和非致细胞病变型（NCP）。 BVDV的基因结构及其蛋白 5-Npro（P20）-C(P14)-Erns(gp48)-E1 (gp25)-E2(gp53)-P7- NS2-3 (P125)-NS4A (P10)- NS4B (P30)- NS5A (P58)- NS5B (P75)-3,其中C，ERNS，E1，E2是病毒的结构蛋白。其余为非结构蛋白。 BVDV的主要基因、蛋白研究进展 ADD YOUR TITLE 核衣壳组成成分，具有免疫原性 BVDV 基因组具有较高的保守性 瘟病毒属内高度保守，在病毒复制、病毒RNA转译或者病毒多聚蛋白加工过程中具有重要作用 5‘-UTR C NS3 ERNS 内有一高度保守结构域，可用于研究亚单位疫苗，也可作为基因工程诊断抗原 E2 与抗BVDV抗体结合、介导免疫中和反应及与宿主细胞识别、吸附的主要部位 Npro 具有自体蛋白酶活性，有较高的保守，可以对瘟病毒进行种、群或型的鉴定 5-UTR：5末端无甲基化的“帽子”结构，5-UTR序列在BVDV的各毒株间有较高的保守性，因此常根据5-UTR的序列设计引物来检测 BVDV或对 BVDV 进行分型。5-UTR 在病毒转录、翻译过程中起重要的作用。 2010年张兴娟等分别用5-UTR设计一对引物，预扩增片段125bp；2010年孟雨等人也利用5-UTR设计一对引物，预扩增片段218bp，实验证明利用5-UTR设计引物具有很好的特异性和敏感性。 E2：是BVDV的主要保护性抗原，能诱导机体产生中和抗体，所以新型疫苗都是针对E2结构蛋白的。也是与抗 BVDV 抗体结合、介导免疫中和反应及与宿主细胞识别、吸附的主要部位，E2 基因一直是国内外学者研究瘟病毒的重点。 E2 是形成 BVD 基因工程疫苗的最好的选择。 BVDV E2 DNA 疫苗是近年来 BVDV 免疫研究的热点。如2007吴明福等构建真核表达质粒 pcDNA3.1(+)-E2 并免疫小鼠，可诱导小鼠产生一定程度的体液和细胞免疫应答。 NS-3：NS3区域与病毒的毒力，生长特性有关。NS3在瘟病毒属内高度保守，在病毒复制、病毒RNA转译或者病毒多聚蛋白加工过程中具有重要作用。NS3的表达与宿主细胞CPE的产生有密切关系。 2009年魏伟等用BVDV NS3 蛋白中有免疫反应性的重组片段作为包被抗原，建立了一个 BVDV 抗体检测的间接 ELISA 方法。 血清学诊断 免疫学诊断 诊断方法的进展 分子生物学诊断 1 2 3 ELISA ELISA 常被用于检测组织器官培养物中 BVDV，监测牛群中 BVD 抗体水平，评估潜伏感染情况。其中最常用的是双抗夹心 ELISA 和间接 ELISA，也有使用 BVDV 单克隆抗体与 ELISA 联合诊断 BVD。 研究较多的IBRV诊断蛋白有NS3，E2蛋白 酶联免疫吸附试验（ELISA） 免疫过氧化物酶技术（IP）诊断 BVDV 准确、可靠，可用于了解 BVD 的总体分布情况。链酶亲和素-生物素过氧化物酶检测方法，可以用来检测福尔马林固定、石蜡包埋组织切片中的BVDV。 近年来，为了避免非特异性染色反应，则可以使用单克隆抗体+生物素化抗鼠抗体-链酶亲和素过氧化物酶检测方法。 免疫过氧化物酶技术（IP） 去除PPT模板上的--无忧PPT整理发布的文字 首先打开PPT模板，选择视图，然后选